美國(guó)圣裘德兒童研究醫(yī)院Kang等基于對(duì)骨髓增生異常綜合征（MDS）患者的觀察，發(fā)現(xiàn)了調(diào)控T細(xì)胞從耗竭前體狀態(tài)（TPEX）向終末耗竭（TEX）狀態(tài)分化的關(guān)鍵表觀遺傳靶點(diǎn)，對(duì)它們進(jìn)行抑制可使T細(xì)胞更好地保持干細(xì)胞樣狀態(tài)，更好地響應(yīng)現(xiàn)有的免疫治療。（Science. 2024年10月11日在線版）

研究發(fā)現(xiàn)，在MDS患者典型臨床表現(xiàn)克隆造血中常見(jiàn)的DNMT3A、TET2和ASXL1基因突變，能使一部分T細(xì)胞長(zhǎng)期保持干性，延緩向TEX狀態(tài)分化，從而擴(kuò)大了它們響應(yīng)免疫治療的時(shí)間窗，攜帶上述基因突變的T細(xì)胞，在實(shí)驗(yàn)中可在慢性抗原刺激下存活超過(guò)1年；其中ASXL1突變是被首次揭示與T細(xì)胞持久力有關(guān)，研究者專(zhuān)門(mén)揭示了它經(jīng)由表觀遺傳調(diào)控T細(xì)胞自我更新的機(jī)制，將ASXL1抑制也可與現(xiàn)有免疫治療協(xié)同增效。

既往在CAR-T細(xì)胞上開(kāi)展的研究已證實(shí)，干預(yù)DNMT3A和TET2的正常功能可延緩T細(xì)胞進(jìn)入終末耗竭階段，使它們持久存在以改善細(xì)胞療法的療效；而ASXL1則是圣裘德兒童研究醫(yī)院研究團(tuán)隊(duì)此前的研究成果，T細(xì)胞存在該突變的MDS患者接受免疫+化療方案治療（阿替利珠單抗+吉西他濱），預(yù)后顯著較野生型或僅有髓系A(chǔ)SXL1突變的患者更好。

該研究中，研究者首先用CRISPR敲除了LCMV特異性CD8+ T細(xì)胞的DNMT3A、TET2和ASXL1基因，再將它們回輸?shù)较鄳?yīng)感染小鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)在LCMV病毒長(zhǎng)期存在、即抗原慢性刺激的情況下，這些LCMV特異性CD8+ T細(xì)胞可存在超過(guò)1年，且通過(guò)增殖保持?jǐn)?shù)量大致穩(wěn)定，而野生型LCMV特異性CD8+ T細(xì)胞的數(shù)量在2個(gè)月后就大大降低。

敲除DNMT3A、TET2和ASXL1也使CD8+ T細(xì)胞的干細(xì)胞特征相關(guān)標(biāo)志物（Ly108）表達(dá)明顯上升，而PD-L1、TIM-3等耗竭標(biāo)志物表達(dá)下調(diào)，且小鼠脾臟和肺部也明確存在TCF1+干細(xì)胞樣CD8+ T細(xì)胞，提示敲除DNMT3A、TET2和ASXL1保存下來(lái)了一部分具有干細(xì)胞樣特征的CD8+ T細(xì)胞亞群，使它們成為響應(yīng)免疫治療的火種。

研究者開(kāi)始探索ASXL1維持T細(xì)胞自我更新能力的表觀遺傳調(diào)控機(jī)制。分析顯示，敲除ASXL1會(huì)改善T細(xì)胞的染色質(zhì)可及性，并通過(guò)降低多梳抑制性去泛素化酶（PR-DUB）復(fù)合物穩(wěn)定性，在TPEX向TEX狀態(tài)分化的過(guò)程中，調(diào)控組蛋白H2AK119位點(diǎn)單泛素化修飾（H2AK119Ub）等多種組蛋白修飾，從而調(diào)節(jié)T細(xì)胞維持干細(xì)胞樣特征和細(xì)胞毒效應(yīng)的關(guān)鍵基因表達(dá)水平，起到保存火種的作用。

在小鼠實(shí)驗(yàn)中，敲除CD8+ T細(xì)胞的ASXL1可有效改善它們?cè)谛∈篌w內(nèi)和過(guò)繼后的抑癌效果，也能與PD-1/L1抑制劑治療實(shí)現(xiàn)協(xié)同增效。對(duì)人類(lèi)實(shí)體瘤患者的分析也證實(shí)，ASXL1突變可為患者帶來(lái)生存優(yōu)勢(shì)。

將腫瘤微環(huán)境內(nèi)因抗原慢性刺激轉(zhuǎn)入耗竭狀態(tài)的CD8+ T細(xì)胞喚醒，使其重新活化為效應(yīng)CD8+ T細(xì)胞，是PD-1/L1抑制劑免疫療法起效的關(guān)鍵。減少T細(xì)胞耗竭的發(fā)生，維持免疫療法的持久療效，該研究成果如何轉(zhuǎn)化為新的治療策略值得深入探討。

（編譯 張俊熙）