復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院毛穎等對(duì)肺癌腦轉(zhuǎn)移樣本進(jìn)行單細(xì)胞測(cè)序后發(fā)現(xiàn)，TKI治療雖然能顯著增加T細(xì)胞對(duì)腫瘤的浸潤(rùn)，但同時(shí)也會(huì)上調(diào)免疫檢查點(diǎn)CTLA4的表達(dá)，導(dǎo)致T細(xì)胞效應(yīng)功能受損，最終形成了免疫抑制性微環(huán)境。研究證實(shí)CTLA4是消除TKI耐藥的有希望的可成藥靶點(diǎn)，CTLA4阻斷治療肺癌腦轉(zhuǎn)移中酪氨酸激酶抑制劑耐藥。（Cancer Cell. 2024年10月9日在線版）

在TKI敏感和TKI耐藥EGFR突變的肺癌腦轉(zhuǎn)移小鼠模型中，研究者證實(shí)了，TKI和CTLA4抑制劑聯(lián)用能有效激活T細(xì)胞，恢復(fù)了T細(xì)胞的抗腫瘤免疫反應(yīng)，克服了腫瘤的免疫逃逸現(xiàn)象，研究結(jié)果或?yàn)榕R床克服肺癌腦轉(zhuǎn)移靶向治療耐藥問題提供了新的解決方案。

第三代EGFR酪氨酸激酶抑制劑（TKI）如奧希替尼不僅能穿透血腦屏障，還可有效靶向顱內(nèi)病灶，因此臨床上常用來治療EGFR突變陽(yáng)性的非小細(xì)胞肺癌腦轉(zhuǎn)移患者。然而，隨著治療時(shí)間延長(zhǎng)，耐藥問題仍難避免。至于耐藥機(jī)制，除了基因突變和一些能讓腫瘤繞過EGFR信號(hào)通路的途徑（如MET擴(kuò)增等）外，免疫微環(huán)境改變也可能是耐藥原因。

研究者對(duì)具有不同遺傳背景和TKI治療史的手術(shù)獲得的LCBM樣本進(jìn)行了單細(xì)胞RNA測(cè)序分析。研究發(fā)現(xiàn)，TKI治療可提高T細(xì)胞中免疫檢查點(diǎn)CTLA4的表達(dá)，促進(jìn)免疫抑制微環(huán)境。這種免疫調(diào)節(jié)是由腫瘤來源的HMGB1響應(yīng)TKIs啟動(dòng)的。在具有TKI敏感或TKI耐藥EGFR突變的LCBM同基因小鼠模型中，CTLA4阻斷聯(lián)合TKIs比TKI單一治療或TKIs聯(lián)合PD1阻斷顯示出更高的療效。

為了全面了解肺癌腦轉(zhuǎn)移患者的免疫特征，研究者收集了31例涵蓋不同基因突變（如EGFR、ALK、P53和KRAS突變）和靶向治療狀態(tài)（即在采樣時(shí)是否接受了TKI治療）的肺癌腦轉(zhuǎn)移腫瘤樣本，并對(duì)這些樣本進(jìn)行了單細(xì)胞RNA測(cè)序。

結(jié)果顯示，與攜帶KRAS和TP53突變的肺癌腦轉(zhuǎn)移樣本相比，攜帶EGFR突變的樣本的T細(xì)胞浸潤(rùn)程度明顯更低。這表明不同基因突變不僅調(diào)控腫瘤的生長(zhǎng)，還影響免疫細(xì)胞在腫瘤中的分布。

進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，在攜帶EGFR突變的樣本中，與未接受TKI治療相比，TKI治療能提升該樣本中T細(xì)胞的浸潤(rùn)水平。對(duì)這些T細(xì)胞進(jìn)行聚類和基因差異表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，雖然TKI治療可增加T細(xì)胞，尤其是CD8陽(yáng)性T細(xì)胞對(duì)腫瘤的浸潤(rùn)，但同時(shí)也上調(diào)免疫檢查點(diǎn)CTLA4在CD8陽(yáng)性T細(xì)胞和CD4陽(yáng)性耗竭T細(xì)胞中的表達(dá)。

由于免疫檢查點(diǎn)是T細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤免疫反應(yīng)的關(guān)鍵，以上結(jié)果提示，盡管TKI治療能讓更多的T細(xì)胞進(jìn)入腫瘤，但CTLA4的高表達(dá)會(huì)下調(diào)免疫應(yīng)答，導(dǎo)致T細(xì)胞效應(yīng)功能受損，并喪失攻擊腫瘤的能力，使免疫微環(huán)境整體呈現(xiàn)抑制狀態(tài)。這一現(xiàn)象也在其他196例臨床樣本中得到驗(yàn)證。

研究者對(duì)TKI治療后CTLA4表達(dá)上調(diào)最終引發(fā)耐藥的機(jī)制進(jìn)行了探討，研究者發(fā)現(xiàn)，TKI治療后會(huì)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞釋放高遷移率組蛋白B1（HMGB1）。HMGB1一方面可以通過TLR2受體激活單細(xì)胞來源的巨噬細(xì)胞，使其釋放趨化因子來募集T細(xì)胞；另一方面還能與T細(xì)胞上的TLR5受體結(jié)合，并通過激活NF-κB信號(hào)通路來上調(diào)CTLA4的表達(dá)，引發(fā)TKI耐藥。

研究者在TKI敏感（EGFR-L860R突變）和TKI耐藥（EGFR-T790M突變）的肺癌腦轉(zhuǎn)移小鼠模型中，測(cè)試了奧希替尼與CTLA4抑制劑聯(lián)合治療的效果。

結(jié)果顯示，無論是在TKI敏感還是在TKI耐藥的肺癌腦轉(zhuǎn)移小鼠模型中，與單獨(dú)使用奧希替尼治療或PD-1抑制劑+奧希替尼聯(lián)合治療相比，奧希替尼+CTLA4抑制劑的聯(lián)合治療不僅能顯著減少腫瘤負(fù)荷，延長(zhǎng)小鼠的存活時(shí)間，還在增加腫瘤中GZMB陽(yáng)性效應(yīng)性T細(xì)胞數(shù)量的同時(shí)，降低了CTLA4陽(yáng)性T細(xì)胞的數(shù)量。根據(jù)生化指標(biāo)和組織學(xué)檢查，這種聯(lián)合療法并不會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的肝臟毒性，有良好的安全性。這些結(jié)果表明，奧希替尼+CTLA4抑制劑的聯(lián)合治療方案能有效激活T細(xì)胞，克服腫瘤的免疫逃逸現(xiàn)象。

該研究深入探討了TKI治療前后肺癌腦轉(zhuǎn)移免疫微環(huán)境的變化，并指出了CTLA4表達(dá)上調(diào)在TKI耐藥中的重要作用。通過TKI和CTLA4抑制劑的聯(lián)合治療，在肺癌腦轉(zhuǎn)移小鼠模型中成功克服了TKI耐藥困局。這些結(jié)果為理解肺癌腦轉(zhuǎn)移治療中的TKI耐藥機(jī)制提供了重要見解，強(qiáng)調(diào)了CTLA4阻斷在有效克服LCBM中TKI耐藥的潛力，為肺癌腦轉(zhuǎn)移的靶免治療提供了新的方向。

（編譯 趙錫明）