中山大學(xué)腫瘤防治中心的駱卉妍、徐瑞華、劉澤先等開展了一項(xiàng)評(píng)估免疫療法聯(lián)合化療對(duì)胃癌伴腹膜轉(zhuǎn)移（GCPM）患者的療效和安全性的Ⅱ期臨床試驗(yàn)，通過對(duì)41萬(wàn)個(gè)細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析，揭示GCPM組織特有的腫瘤微環(huán)境。研究表明，相比于原發(fā)性胃癌組織，GCPM組織富集免疫抑制表型的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞和腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞，它們通過補(bǔ)體C3及其受體相互作用，在GCPM中形成髓系細(xì)胞-基質(zhì)細(xì)胞生態(tài)位，介導(dǎo)了GCPM對(duì)免疫治療的抗性。（Gut. 2024年11月12日在線版）

這是首次基于單細(xì)胞水平解析GCPM對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療反應(yīng)機(jī)制的研究。研究者開展的這項(xiàng)干預(yù)性、多中心、開放Ⅱ期臨床研究，旨在觀察白蛋白結(jié)合型紫杉醇腹腔灌注聯(lián)合靜脈注射信迪利單抗-SOX方案在初診的成年GCPM患者中的安全性和療效。

研究者獲取其中19例病情不同程度緩解的GCPM患者的手術(shù)切除或活檢樣本，總計(jì)對(duì)5個(gè)組織類型的41 061 241個(gè)細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析。

結(jié)果顯示，原發(fā)性胃癌組織以肥大細(xì)胞和漿細(xì)胞為主，而GCPM組織則特異性富集腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAM）、腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAF）、內(nèi)皮細(xì)胞。KEGG通路分析表明，GCPM組織中與細(xì)胞外基質(zhì)、補(bǔ)體及凝血系統(tǒng)相關(guān)的通路顯著上調(diào)，而炎癥通路下調(diào)，反映出免疫抑制、基質(zhì)成分增加以及血管生成增強(qiáng)的特征。

研究者將KLRD1陽(yáng)性自然殺傷T細(xì)胞（NKT）鑒定為GCPM的免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療中的關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞。KLRD1陽(yáng)性NKT具有T細(xì)胞和NK細(xì)胞的雙重表型，高表達(dá)與抗原識(shí)別和細(xì)胞毒性相關(guān)的基因（如CD16和KLRD1）。分析表明，與對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療反應(yīng)不佳的GCPM患者相比，KLRD1陽(yáng)性NKT在反應(yīng)較好的患者GCPM腫瘤和外周血單個(gè)核細(xì)胞中大量擴(kuò)增。這意味著NKT細(xì)胞可能是GCPM中發(fā)揮腫瘤殺傷的主要細(xì)胞類型，為開發(fā)嵌合抗原受體-NKT（CAR-NKT）療法應(yīng)用于GCPM治療提供了基礎(chǔ)。

研究者發(fā)現(xiàn)，在GCPM中，組織駐留巨噬細(xì)胞更傾向于分化為促腫瘤的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（SPP1陽(yáng)性TAM），高表達(dá)TREM2、HAVCR2等免疫抑制分子，通過SPP1-CD44軸與細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞相互作用，抑制其抗腫瘤活性。而在原發(fā)性胃癌組織中，更傾向于分化為抗腫瘤表型巨噬細(xì)胞。

GCPM中的成纖維細(xì)胞亞群組成與原發(fā)性胃癌也有所不同。在GCPM中，基質(zhì)型腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（mCAF）顯著富集，高表達(dá)THBS2、IGF1等促腫瘤因子，而促炎型腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（iCAF）減少。在對(duì)免疫抑制劑治療耐藥的患者中，THBS2陽(yáng)性mCAF比例更高，而且研究團(tuán)隊(duì)還基于TCGA的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)高水平的THBS2陽(yáng)性CAF與GCPM患者較低的5年總生存率和無(wú)進(jìn)展生存率相關(guān)。

巨噬細(xì)胞和腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞通過C3-C3AR1信號(hào)通路連接，共同構(gòu)成GCPM特有的基質(zhì)細(xì)胞-髓系細(xì)胞生態(tài)位。研究表明，GCPM中的mCAF通過分泌補(bǔ)體C3，與腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞上的受體（C3AR1）結(jié)合將其招募過來(lái)，合力打造免疫抑制的腫瘤微環(huán)境。

荷瘤小鼠實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，C3AR拮抗劑SB290157單獨(dú)治療即可顯著抑制腫瘤生長(zhǎng)，減少腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)，增加腫瘤浸潤(rùn)C(jī)D8+ T細(xì)胞數(shù)量，改善腫瘤微環(huán)境。C3AR拮抗劑聯(lián)合PD-1抑制劑治療時(shí)，比PD-1抑制劑單獨(dú)治療表現(xiàn)出更強(qiáng)的腫瘤抑制作用。

該研究揭示了巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、C3-C3AR1信號(hào)通路如何構(gòu)建GCPM的免疫抑制微環(huán)境、構(gòu)成免疫治療耐藥性，并表明靶向干預(yù)C3-C3AR1通路可能為免疫抑制劑治療耐藥的患者帶來(lái)更有效的治療方案。

（編譯 王涵曦）