近年來，接受CAR-T療法的患者中，有些出現(xiàn)一種罕見的反?，F(xiàn)象，在治療的幾周后，患者病情緩解，但是突然出現(xiàn)記憶失常甚至死亡，背后的原因竟是常見的人皰疹病毒-6型（HHV-6）感染導致腦炎所致。

正常情況下，HHV-6潛伏在人體內，與人類和平相處。這些HHV-6是從哪來，又為何會導致這些并發(fā)癥呢？美國念斯隆·凱特琳癌癥中心Lareau等研究發(fā)現(xiàn)，在CAR-T細胞中存在具有很高病毒轉錄活性的HHV-6“超級表達者”群體，大約每300~10 000個CAR-T細胞中，就會出現(xiàn)一個這樣的“超級表達者”CAR-T細胞。

在分析接受FDA批準或處于臨床研究階段的CAR-T細胞治療的患者的單細胞測序數(shù)據(jù)后，研究者證實這些患者體內存在HHV-6“超級表達者”CAR-T細胞?；谶@一研究結果，研究者認為，CAR-T細胞中重新被激活的HHV-6可能是CAR-T治療后HHV-6感染的來源之一。

HHV-6感染在人群中十分普遍，90%的人初次感染HHV-6發(fā)生在嬰兒期，隨后HHV-6進入漫長的潛伏期，穩(wěn)定存在于健康人體內。雖然嬰兒期原發(fā)性HHV-6感染很少引起并發(fā)癥，但成年后HHV-6的再激活可導致包括腦炎在內的嚴重疾病。對于化療等情況導致的免疫力低下人群，HHV-6的再激活甚至會導致死亡。

在之前的研究中，研究者已發(fā)現(xiàn)HHV-6有可能在T細胞中重新激活，當他們注意到2022年發(fā)表在《新英格蘭醫(yī)學雜志》上的病例報告后，研究者猜測可能是CAR-T細胞中的HHV-6再激活，導致了CAR-T細胞治療之后的腦炎。

在研究CAR-T細胞之前，研究者先基于已有數(shù)據(jù)庫，了解了已知具有潛伏復制周期并能在體內重新激活的多種病毒在T細胞中的再激活情況，結果發(fā)現(xiàn)HHV-6激活程度最高。隨后，又通過體外培養(yǎng)T細胞，證實了HHV-6確可在T細胞中重新激活。

研究者隨后研究了4名捐獻者的CAR-T細胞。在培養(yǎng)的過程中，研究者發(fā)現(xiàn)HHV-6激活現(xiàn)象，并證實隨著時間的推移，HHV-6核酸在T細胞中會變得越來越多。這種現(xiàn)象與病毒再激活一致。實驗結果還表明，HHV-6的再激活不是在CAR-T細胞中均勻地展開，而只有一部分CAR-T細胞在最開始出現(xiàn)HHV-6再激活，研究者把這部分細胞稱作“超級表達者”?？偟膩砜?，在不同的患者體內，大約有0.01%~0.3%的細胞（360~10 000

個細胞中的1個）重新激活或高水平表達HHV-6轉錄本。

在將T細胞擴增時間延到25天和/或27天后，研究者發(fā)現(xiàn)，與培養(yǎng)的第20天相比，HHV-6轉錄本的豐度增加了約1200~2000倍，49%和62%的T細胞（包括CD4或CD8陽性）都成了HHV-6“超級表達者”，這表明發(fā)生了裂解再激活和病毒擴散。

是否是CAR-T制作過程導致HHV-6再激活呢，答案是否定的。在重現(xiàn)CAR-T制作工藝的19天里（標準流程時間），研究者未觀察到HHV-6激活。于是，研究者基于自己的研究數(shù)據(jù)提出了一個模型，在這一模型中，HHV-6的再激活是一個隨機事件，可能受細胞培養(yǎng)過程中各種因素和宿主細胞內在差異的影響。

在接受FDA批準等CAR-T細胞治療的患者隊列中，研究者注意到，給患者回輸前的CAR-T細胞中，沒有HHV-6激活，但是在回輸后的CAR-T樣本中，發(fā)現(xiàn)了HHV-6的激活。在將1例患者回輸前的CAR-T細胞額外培養(yǎng)兩周的時間里，研究者發(fā)現(xiàn)，在額外培養(yǎng)的5~14天能持續(xù)檢測到HHV-6的激活。

基于這些數(shù)據(jù)，研究者認為，在CAR-T細胞產(chǎn)品制成后的2~3周期間，可在體外或體內檢測到HHV-6的激活。也就是說，CAR-T細胞培養(yǎng)的時間，是HHV-6激活的關鍵。這一結論，也被培養(yǎng)時間較長的異體CAR-T細胞證實。

研究者發(fā)現(xiàn)，有一例患者曾使用膦甲酸（Foscarnet）控制HHV-6感染，并取得較好的效果。研究者探討了在CAR-T細胞生產(chǎn)過程中加入膦甲酸是否可抑制HHV-6的激活和擴散，結果發(fā)現(xiàn)膦甲酸確可大幅降低HHV-6激活水平，且?guī)缀醪挥绊慍AR-T細胞的狀態(tài)。研究者認為，未來研究有必要探索膦甲酸的最佳用量、使用時間等，以期抑制CAR-T細胞中HHV-6的激活。

該研究表明，在初始T細胞和CAR-T細胞中，均存在HHV-6再激活現(xiàn)象。HHV-6的再激活與CAR無關，而是與T細胞的活化、增殖和培養(yǎng)時間長短有關，且有裂解活性的HHV-6會隨著時間的推移而增加。雖然發(fā)現(xiàn)了HHV-6再激活現(xiàn)象，但CAR-T療法的臨床應用仍應支持，治療過程中出現(xiàn)的HHV-6感染導致的腦炎是可治的，并且這種HHV-6再激活導致的腦炎并不常見，而CAR-T療法是可挽救患者生命的革命性療法。雖然目前沒有規(guī)定在輸注前對細胞治療產(chǎn)品進行潛在病毒檢測，但未來希望能有相關檢測，以期預防不良事件的發(fā)生，進一步改善患者預后。

（編譯 張娜）