兒童低級(jí)別神經(jīng)膠質(zhì)瘤是兒童顱腦腫瘤中最常見的類型，是一組異質(zhì)性較強(qiáng)的腫瘤，很難單純根據(jù)組織學(xué)和部位來分類。美國賓夕法尼亞州立大學(xué)Payal Jain等開展的一項(xiàng)臨床前研究顯示：兒童低級(jí)別神經(jīng)膠質(zhì)瘤的主要發(fā)病驅(qū)動(dòng)因素為CRAF融合蛋白，而非BRAF融合蛋白;CRAF融合蛋白對(duì)RAF抑制劑的治療無應(yīng)答，對(duì)MEK抑制劑單藥治療只有部分應(yīng)答。但是，CRAF融合蛋白對(duì)靶向MAPK和PI3K信號(hào)通路的聯(lián)合治療產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)答。因此，對(duì)低級(jí)別神經(jīng)膠質(zhì)瘤兒童患者進(jìn)行的分子分層對(duì)于明確合適的治療非常重要。(2015年AACR-NCI-EORTC分子靶標(biāo)與癌癥治療大會(huì). 摘要號(hào) A138)

研究方法

該實(shí)驗(yàn)以BRAF融合蛋白的表達(dá)及空載細(xì)胞系作為對(duì)照;在異種細(xì)胞模型系統(tǒng)(NIH3T3細(xì)胞)中，免疫印跡法不但驗(yàn)證了CRAF融合蛋白的穩(wěn)定表達(dá)，而檢測(cè)了下游信號(hào)通路不同分子的表達(dá)情況。通過軟瓊脂成瘤試驗(yàn)及在免疫缺陷小鼠腹側(cè)皮下進(jìn)行的異種細(xì)胞移植成瘤試驗(yàn)來驗(yàn)證CRAF融合蛋白的致瘤性。

利用第一代RAF抑制劑PLX4720(vemurafenib的研究版藥物)及第二代的RAF抑制劑PLX8394，以及MEK抑制劑抑制性篩選CRAF融合蛋白介導(dǎo)的致瘤活性。一旦體外研究驗(yàn)證出有抑瘤效果的藥物，則通過免疫缺陷小鼠移植成瘤試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證其體內(nèi)抑瘤效果。

研究結(jié)果

CRAF融合蛋白能激活MAPK及PI3K信號(hào)傳導(dǎo)通路。與BRAF融合蛋白相比，CRAF融合蛋白對(duì)本研究中所使用的RAF抑制劑、PLX8394的反式阻斷劑(第二代RAF抑制劑)均無應(yīng)答。AZD6244和GSK1120212/trametinib都是MEK抑制劑，能夠阻斷下游ERK的磷酸化信號(hào)，并抑制穩(wěn)定表達(dá)CRAF融合蛋白NIH3T3細(xì)胞的成瘤。在免疫缺陷小鼠移植成瘤實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，GSK1120212可以部分抑制CRAF融合蛋白所驅(qū)動(dòng)的腫瘤生長。由于CRAF融合蛋白也可以激活PI3K信號(hào)通路，聯(lián)合應(yīng)用MEK抑制劑GSK1120212和mTOR抑制劑依維莫司對(duì)動(dòng)物模型可產(chǎn)生強(qiáng)烈的抑瘤效應(yīng)。

研究者認(rèn)為，就對(duì)靶向治療的應(yīng)答性而言，CRAF融合蛋白與BRAF融合蛋白的表現(xiàn)是不一樣的。因此有必要對(duì)治療前的兒童低級(jí)別神經(jīng)膠質(zhì)瘤(PLGG)患者進(jìn)行分子分層，這可為此類患者的聯(lián)合治療提供依據(jù)。

Jain指出，他們的研究結(jié)果強(qiáng)調(diào)了低級(jí)別神經(jīng)膠質(zhì)瘤分子分型的重要性，而且該分型的意義不僅僅限于低級(jí)別神經(jīng)膠質(zhì)瘤的個(gè)體化治療，對(duì)表達(dá)CRAF融合蛋白的其他癌癥患者的大型臨床研究中同樣重要。

(編譯 李達(dá))