美國約翰斯·霍普金斯大學(xué)病理科的Robert A. Anders撰文評論表示，對于特定的患者而言，靶向療法優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)化療，因此需要使用有效的預(yù)測標(biāo)志物判斷出可能對靶向療法產(chǎn)生應(yīng)答的患者。(JAMA Oncol.2015年11月12日在線版)

對于免疫療法而言，尤其是以PD-1/PD-L1軸為靶標(biāo)的療法，免疫組化印記染色是一種能夠幫助治療決策的伴隨診斷工具。PD-1/PD-L1通路很復(fù)雜，PD-1受體與PD-L1和PD-L2結(jié)合，阻斷腫瘤細(xì)胞的免疫殺傷。而當(dāng)PD-L1上調(diào)時，某些腫瘤的侵襲性增強(qiáng)，導(dǎo)致患者預(yù)后差。因此新的抗PD-1/PD-L1免疫療法旨在阻斷PD-1/PD-L1的交互作用，使得T淋巴細(xì)胞能夠攻擊腫瘤細(xì)胞，改善一部分患者的臨床轉(zhuǎn)歸。

早期臨床試驗表明，缺乏PD-L1表達(dá)的腫瘤患者不太可能對抗PD-1靶向療法產(chǎn)生應(yīng)答。后續(xù)研究則表明，多種PD-L1陰性的癌癥患者的總應(yīng)答率為15%，而PD-L1陽性腫瘤患者的應(yīng)答率則達(dá)48%。精準(zhǔn)的免疫組化印記染色結(jié)果判讀對于避免假陰性PD-L1判讀結(jié)果和后續(xù)治療選擇而言至關(guān)重要。

目前逐漸得到認(rèn)可的一個觀點是，腫瘤包塊內(nèi)部、周邊或外側(cè)的炎性細(xì)胞也可表達(dá)PD-L1，并且這些PD-L1陽性細(xì)胞可能代表著腫瘤細(xì)胞的宿主免疫反應(yīng)。

McLaughlin等開展的研究考察了幾個導(dǎo)致PD-L1結(jié)果假陰性的因素。首先，腫瘤樣本可能不足，或無法代表整個腫瘤包塊。而診斷性采樣通常僅針對患者腫瘤的一小部分，全切術(shù)也同樣存在局限性，因為鏡檢時也僅使用一部分代表性的切片。典型的情況是，一個5 cm的球狀腫瘤僅有0.001%的體積接受了鏡檢。

研究者認(rèn)為，PD-L1表達(dá)存在異質(zhì)性，并且在NSCLC活檢樣本中的表達(dá)呈局灶性高度集中。但該研究發(fā)現(xiàn)PD-L1在腫瘤和非腫瘤連接部位的表達(dá)趨勢并無統(tǒng)計學(xué)差異，提示連接部位可能代表著對入侵腫瘤細(xì)胞的宿主免疫反應(yīng)。

其次，由于至少有12種不同的抗PD-L1靶向抗體，因此靶向表位、同型以及來源的差異程度不可小覷。不同抗體對同種腫瘤樣本的作用至今尚未得以明確，McLaughlin等則對2種常用的家兔單克隆抗體(SP142和E1L3N)進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，若腫瘤樣本表達(dá)PD-L1，則不論使用的檢測閾值為1%、5%還是50%，κ一致率均偏低。目前尚無充分?jǐn)?shù)據(jù)可用于比較所有抗PD-L1抗體的表現(xiàn)。

最后一個造成PD-L1結(jié)果假陰性的因素是免疫組化印記染色結(jié)果判讀過程的準(zhǔn)確性及重現(xiàn)性。多種細(xì)胞(腫瘤細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、炎性浸潤細(xì)胞)均可通過細(xì)胞膜染色或胞質(zhì)染色而表達(dá)PD-L1。進(jìn)行特異性染色之后，仍然需要病理醫(yī)生主觀甄別各種細(xì)胞類型及主觀計算它們在每種染色方法下的百分比。

而數(shù)碼攝片分析對免疫組化印記染色進(jìn)行定量判讀，則可在很大程度上減少觀測者間的變異。因為標(biāo)準(zhǔn)的免疫組化印記染色結(jié)果基本為二元性(即，陽性 vs陰性)，因此使用熒光抗體技術(shù)可擴(kuò)大目標(biāo)染色強(qiáng)度的范圍。另外，熒光染色還具有可定量的優(yōu)點，但同時也面臨著更高的技術(shù)要求和成本問題。Rimm等開發(fā)了一種定量免疫熒光法，該方法能夠客觀地測定腫瘤和基質(zhì)部位的靶細(xì)胞。若在當(dāng)前的研究中使用該方法，雖然靈敏度得以提高，但仍面臨腫瘤間PD-L1表達(dá)水平異質(zhì)性的問題，以及兩種不同抗體一致性低的問題。

個體化免疫療法的第一步在于篩選出最有可能對抗PD-L1治療產(chǎn)生應(yīng)答的患者亞群。免疫組化印記染色法檢測PD-L1的靈敏度低、重現(xiàn)性差，結(jié)果可能使某些患者無緣進(jìn)入臨床試驗。為了向盡可能多的患者提供這種或能夠挽救生命的個體化免疫療法，需要研制一種囊括多層面的預(yù)測性生物標(biāo)志物體系，將諸如PD-L1的免疫檢查點抑制劑、腫瘤突變和炎癥細(xì)胞整合起來。

(編譯 石磊)