美國Augusta大學Verma等發(fā)現(xiàn)，PD-1抗體會作用于沒有被腫瘤相關(guān)抗原激活或激活不充分的殺傷性T細胞，導致這些細胞功能紊亂，最終抑制有抗腫瘤活性T細胞的抗腫瘤能力，甚至殺死這些能抗癌的T細胞。(Nat Immunol. 2019; 20: 1231-1243. doi: 10.1038/s41590-019-0441-y)

此前有大量研究表明，很多腫瘤患者體內(nèi)，存在大量未被腫瘤相關(guān)抗原激活或激活不充分的殺傷性T細胞。研究者發(fā)現(xiàn)，在PD-1抗體治療同時，如果給荷瘤小鼠足夠的抗原刺激，如抗腫瘤疫苗治療，就可以根除腫瘤對PD-1抗體的耐藥性。但在PD-1抗體治療后再使用抗腫瘤疫苗治療則無效，甚至連疫苗的抗腫瘤效果也被消解了。

為了探討解決大部分腫瘤對PD-1抗體的耐藥性，研究者嘗試將抗腫瘤疫苗與PD-1抗體聯(lián)合使用。

理論上講，抗腫瘤疫苗可增加殺傷性T細胞的抗原暴露和激活，而PD-1抗體可解除腫瘤對免疫細胞的抑制，把這兩種療法聯(lián)合使用，應該可以優(yōu)勢互補。

但研究者發(fā)現(xiàn)了一個奇怪的現(xiàn)象，給小鼠單獨注射PD-1抗體，與不治療的對照組相比，殺傷性T細胞和抗原特異性殺傷性T細胞均無顯著差異，小鼠的腫瘤也無明顯改變，因為已經(jīng)耐藥。

給小鼠單獨注射抗腫瘤疫苗，小鼠體內(nèi)的抗原特異性殺傷性T細胞數(shù)量增多，提示疫苗發(fā)揮了作用，只不過抗腫瘤效果不明顯，小鼠腫瘤無顯著改變。把疫苗和PD-1抗體同時注射給小鼠，小鼠體內(nèi)抗原特異性殺傷性T細胞數(shù)量就更多了，小鼠存活率明顯提高了，提示二者聯(lián)合是有增效的。

最后一組先注射PD-1抗體，3天后再注射抗腫瘤疫苗，結(jié)果小鼠的腫瘤生長失控了，PD-1抗體聯(lián)合抗腫瘤疫苗完全無效，就像沒有接受治療一樣。研究者在其他PD-1抗體耐藥的小鼠模型中重復了一遍實驗，結(jié)果一致。

這些腫瘤對PD-1抗體耐藥，很有可能是殺傷性T細胞被抗原刺激不夠造成的，這在此后的研究中得到了證實，的確是PD-1抗體影響了沒被抗原充分激活的T細胞，導致了腫瘤對PD-1抗體的耐藥性。

鑒于激活不充分的T細胞在各瘤種中廣泛存在，找到潛在原因，有望解決這一大部分患者的耐藥問題。研究者比較了只用抗腫瘤疫苗、疫苗與PD-1抗體同時使用、先用PD-1抗體再用疫苗三種情況下，小鼠體內(nèi)T細胞的差異，發(fā)現(xiàn)在疫苗之前使用PD-1抗體，導致小鼠體內(nèi)總T細胞和抗原特異性T細胞的凋亡性死亡增加，這種凋亡可以持續(xù)到疫苗注射后13天，多種腫瘤模型中均可觀察到這一現(xiàn)象。

研究者還發(fā)現(xiàn)，T細胞的凋亡不是PD-1抗體激活最終誘導的細胞死亡，而極有可能是PD-1信號與TCR信號的串擾，導致T細胞功能紊亂，最終走向死亡。

兩年前有研究者在PD-1抗體耐藥的腫瘤中發(fā)現(xiàn)了一類CD38高表達的PD-1陽性殺傷性T細胞，進一步分析研究者發(fā)現(xiàn)，疫苗治療前接受PD-1抗體，確會導致T細胞CD38表達增加，無論總T細胞還是抗原特異性T細胞，CD38表達都增加，且這些T細胞即使在被抗原激活后，也不能產(chǎn)生INF-γ。

同時使用疫苗和PD-1抗體，CD38表達水平會下降，PD-1陽性CD38高表達的抗原特異性T細胞也減少，抗原刺激后，INF-γ大量產(chǎn)生。CD38高表達的T細胞在被抗原刺激后會凋亡。

研究者在一個腫瘤患者隊列中驗證了這些發(fā)現(xiàn)，相比PD-1抗體治療效果好的患者，PD-1抗體治療無效的患者體內(nèi)CD38高表達殺傷性T細胞明顯高很多。所有PD-1抗體治療無效的患者腫瘤微環(huán)境中CD38高表達殺傷性T細胞都大于4%;而只有25%的PD-1抗體治療效果好的患者體內(nèi)有這么多異常T細胞。

以這個標準來判斷PD-1抗體療效的話，靈敏性達100%，特異性為75%，ROC曲線下面積為0.887。提示CD38高表達殺傷性T細胞有望成為PD-1抗體療效預測的生物標志物。研究者發(fā)現(xiàn)，直接通過血液中單個核細胞(PBMCs)的CD38水平，就可以預測PD-1抗體的治療效果。

研究者認為，該研究提示，沒有被抗原激活，或者激活不充分的CD8陽性T細胞，在接觸PD-1抗體之后，會變成CD38高表達的無功能T細胞，使得腫瘤對PD-1抗體產(chǎn)生耐藥性。如果在PD-1抗體治療前，適當?shù)赜每拱┮呙缣幚恚瑫獬[瘤對PD-1抗體的耐藥性(這也在一定程度上解釋了，腫瘤突變負荷高的癌種，更有可能從PD-1抗體治療中獲益)。這個發(fā)現(xiàn)也為PD-1抗體聯(lián)合抗癌疫苗治療的臨床研究，提供了治療策略：要首先使用抗癌疫苗，或者至少二者同時使用。

(編譯 趙佳樂)