復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院蔡國響教授與上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院王爭教授等報告的隊列研究的結(jié)果表明，循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)甲基化的縱向評估可能有助于Ⅰ~Ⅲ期結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)的早期發(fā)現(xiàn)及復(fù)發(fā)風(fēng)險分層，優(yōu)化結(jié)直腸癌患者的風(fēng)險分層和術(shù)后治療。(JAMA Oncol. 2023年4月20日在線版)

及早發(fā)現(xiàn)分子殘留病變并進(jìn)行危險分層，可提高腫瘤患者的治療效果。因此，需要進(jìn)行有效的實用型測試。結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)率較高，ctDNA檢測是研究熱點，現(xiàn)有研究多聚焦于高通量測序技術(shù)(NGS)檢測的ctDNA突變，流程復(fù)雜、周期長、成本較高，普適性不足。

該研究基于鹍遠(yuǎn)生物自主研發(fā)的CRC多基因甲基化檢測技術(shù)ColonAiQ(常 艾 克)，前期研究中證實了ctDNA甲基化在Ⅰ~Ⅲ期結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)風(fēng)險分層、指導(dǎo)治療決策及早期復(fù)發(fā)監(jiān)測中的應(yīng)用價值，為這一無創(chuàng)血液篩查和監(jiān)測技術(shù)進(jìn)入臨床實踐提供了依據(jù)，使其有望成為兼具靈敏度、時效性和經(jīng)濟(jì)性的，可惠及眾多結(jié)直腸癌患者分子殘留疾病的檢測新指標(biāo)。

這項多中心前瞻性縱向隊列研究在2019年12月12日至2022年2月28日進(jìn)行，從兩家醫(yī)院招募了350例Ⅰ~Ⅲ期結(jié)直腸癌患者，采集了術(shù)前(7天)、術(shù)后1個月及輔助治療后隨訪各時間點(每隔3個月)的血液樣本1228份，采用多重、ctDNA甲基化、定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測血液樣本中的ctDNA。主要研究終點為無復(fù)發(fā)生存。

結(jié)果顯示，ctDNA可預(yù)測結(jié)直腸癌患者復(fù)發(fā)風(fēng)險，ctDNA陽性患者的復(fù)發(fā)風(fēng)險顯著高于陰性者(HR=17.5，95%CI 8.9~34.4，P<0.001)。ctDNA預(yù)測復(fù)發(fā)的靈敏度為78.0%，特異度90.2%，在不同分期的腸癌中均保持預(yù)測效能穩(wěn)健。

ctDNA預(yù)測復(fù)發(fā)的性能優(yōu)于癌胚抗原CEA，ctDNA和CEA聯(lián)合檢測可提高預(yù)測復(fù)發(fā)的效能(AUC=0.849)，優(yōu)于ctDNA(AUC=0.839)和CEA(AUC=0.623)，且陽性患者復(fù)發(fā)風(fēng)險更高(HR=19.0，P<0.001)。

ctDNA可實現(xiàn)復(fù)發(fā)風(fēng)險分層，指導(dǎo)治療決策，避免過度治療。將Ⅲ期患者依據(jù)臨床復(fù)發(fā)風(fēng)險評估(高風(fēng)險T4/N2和低風(fēng)險T1-3

N1)和輔助治療周期(3或6個月)劃分為不同亞組。ctDNA陽性高風(fēng)險人群中，接受6個月輔助治療的患者復(fù)發(fā)風(fēng)險更低;低風(fēng)險人群中，輔助治療周期與患者復(fù)發(fā)風(fēng)險間無顯著相關(guān)。ctDNA陰性患者無論臨床復(fù)發(fā)風(fēng)險與輔助治療周期，預(yù)后均顯著優(yōu)于ctDNA陽性患者。未接受輔助治療的Ⅰ期和低風(fēng)險Ⅱ期CRC患者中，66.7%的ctDNA陽性患者2年內(nèi)復(fù)發(fā)，而所有ctDNA陰性患者均未在2年內(nèi)復(fù)發(fā)。

綜合治療(手術(shù)+ACT或單純手術(shù))結(jié)束及后續(xù)隨訪，ctDNA可較影像學(xué)最多提前約20個月提示腫瘤復(fù)發(fā)，綜合治療結(jié)束后，ctDNA陽性患者的RFS與陰性患者相比顯著降低(HR=20.6，P<0.001)，在治療后隨訪監(jiān)測的任一時間點，ctDNA陽性皆與更差的預(yù)后有關(guān)(HR=13.5，P<0.001)，ctDNA檢測持續(xù)陽性的患者RFS顯著低于檢測持續(xù)陰性的患者(HR=68.8，P<0.001)。

研究解讀

這項創(chuàng)新性表觀遺傳學(xué)液體活檢技術(shù)研究得到國際結(jié)直腸癌分子診斷標(biāo)志物和表觀遺傳學(xué)研究領(lǐng)域權(quán)威專家Ajay Goel教授(美國希望之城醫(yī)學(xué)中心)的高度評價。Ajay Goel教授表示，這項研究結(jié)果和其他獨立隊列研究明確了基于ctDNA預(yù)測的分子殘留疾病可作為Ⅰ~Ⅲ期結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)的最顯著風(fēng)險因素，獨立于腫瘤分期和其他經(jīng)典臨床病理風(fēng)險因素。將ctDNA分子殘留疾病檢測與癌胚抗原水平分析相結(jié)合，進(jìn)一步提高患者復(fù)發(fā)的預(yù)測效果。該項液體活檢檢測是一種簡單且具成本效益的手段，更有利于在臨床實踐中進(jìn)行檢測及分層管理。

選擇DNA甲基化作為新型MRD標(biāo)志物，相比于突變檢測，優(yōu)勢在于不需要做腫瘤組織的全基因組測序篩選，直接用于血液檢測，而且避免因檢出源自正常組織、良性疾病和克隆性造血的體細(xì)胞突變而導(dǎo)致假陽性結(jié)果。

該研究是國際上首個應(yīng)用基于PCR的血液ctDNA多基因甲基化技術(shù)于結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)預(yù)測和復(fù)發(fā)監(jiān)測的多中心研究，提供了一個與現(xiàn)有MRD檢測技術(shù)方法相比性價比更高的技術(shù)路徑和解決方案，有望大大提高結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)預(yù)測和監(jiān)測的臨床使用普及率，并顯著改善病人的生存期和生存質(zhì)量。

(編譯 朱敏)