賓夕法尼亞大學(xué)Perelman醫(yī)學(xué)院及諾華公司生物研究所的研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)修飾的免疫細(xì)胞能尋找并攻擊小鼠致死性腦腫瘤，且能安全有效地控制腫瘤生長(zhǎng)。該研究結(jié)果為針對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者近期開展的臨床試驗(yàn)做了很好的鋪墊。（Science Translational Medicine.）

賓夕法尼亞大學(xué)Abramson腫瘤中心血液腫瘤的Marcela Maus教授認(rèn)為2010年開展的一系列實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，基因修飾的T細(xì)胞在治療部分血液腫瘤上有一定效果，但將此方法運(yùn)用到實(shí)體腫瘤治療卻有一定難度，運(yùn)用基因修飾T細(xì)胞技術(shù)的挑戰(zhàn)一方面是找到作用于腫瘤細(xì)胞而非正常組織的最佳靶點(diǎn)，這是T細(xì)胞治療有效且安全的關(guān)鍵所在。

臨床前實(shí)驗(yàn)

美國(guó)匹茲堡大學(xué)腫瘤中心的Hideho Okada教授及其研究團(tuán)隊(duì)聯(lián)合開展的臨床前實(shí)驗(yàn)，細(xì)述了基因修飾T細(xì)胞的設(shè)計(jì)及運(yùn)用。運(yùn)用基因工程使這類T細(xì)胞表達(dá)一個(gè)能靶向表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR Ⅷ）突變的嵌合抗原受體，而表皮生長(zhǎng)因子受體在30%的膠質(zhì)細(xì)胞瘤患者的腫瘤中有表達(dá)。有EGFR Ⅷ突變表達(dá)的患者多為惡性程度高的膠質(zhì)細(xì)胞瘤。這類腫瘤使用常規(guī)治療方案效果不佳且更容易復(fù)發(fā)。賓夕法尼亞大學(xué)佩雷爾曼醫(yī)學(xué)院神經(jīng)外科主任M. Sean Grady教授認(rèn)為患有此類腦腫瘤的患者預(yù)后差，大多數(shù)患者確診后生存時(shí)間少于18個(gè)月，該研究為多個(gè)領(lǐng)域?qū)＜夜餐_創(chuàng)革新腦腫瘤的個(gè)體免疫治療。Maus教授將一系列特征性EGFR Ⅷ CAR-T細(xì)胞實(shí)驗(yàn)形容為創(chuàng)世紀(jì)的“杰作”。首先，該團(tuán)隊(duì)研制并且檢測(cè)了多種抗體，或單鏈抗體可變區(qū)基因片段（scFv），可捆綁表達(dá)EGFR Ⅷ的細(xì)胞。嚴(yán)格的檢測(cè)識(shí)別突變EGFR Ⅷ蛋白的scFv證明了他們沒有表達(dá)于正常細(xì)胞上；未突變的EGFR蛋白廣泛表達(dá)于正常細(xì)胞。此研究接著合成了一組人源性的scFv并且檢測(cè)其特異性及對(duì)CAR修飾T細(xì)胞的作用。除了檢測(cè)這組人源性scFv，該研究組選擇了一個(gè)scFv進(jìn)一步研究其在選擇性捆綁EGFR Ⅷ陽性細(xì)胞多于正常非EGFR Ⅷ陽性細(xì)胞。研究者同時(shí)評(píng)估了利用EGFR表達(dá)正常的皮膚細(xì)胞在小鼠和人類皮膚移植后的EGFR Ⅷ CAR-T細(xì)胞。在此模型中，他們發(fā)現(xiàn)經(jīng)過處理的EGFR Ⅷ CAR-T細(xì)胞不會(huì)攻擊正常EGFR的細(xì)胞。接著檢測(cè)了關(guān)鍵scFv的抗腫瘤效應(yīng)。研究人類腫瘤細(xì)胞，科學(xué)家們認(rèn)為，EGFR Ⅷ CAR-T細(xì)胞能增殖并且分泌細(xì)胞因子以對(duì)抗表達(dá)EGFR Ⅷ蛋白的腫瘤細(xì)胞。重要的是，通過MRI等手段，研究者們發(fā)現(xiàn)EGFR Ⅷ CAR-T細(xì)胞在不同的膠質(zhì)細(xì)胞瘤鼠模型中能控制腫瘤增長(zhǎng)。通過MRI等手段，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)小鼠腦部的腫瘤出現(xiàn)萎縮的現(xiàn)象，當(dāng)這種療法和化療藥物替莫唑胺聯(lián)用時(shí)，一些小鼠腦部的腫瘤甚至消失。

臨床Ⅰ期試驗(yàn)

基于前期實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，研究者設(shè)計(jì)了臨床Ⅰ期試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)中CAR-T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)了人源性的scFv靶向EGFR Ⅷ，該研究對(duì)象包括攜帶突變EGFR Ⅷ基因的新患者及復(fù)發(fā)型患者。該試驗(yàn)計(jì)劃由神經(jīng)外科Donald M. O'Rourke教授和神經(jīng)外科醫(yī)生、神經(jīng)腫瘤學(xué)醫(yī)生、神經(jīng)病理學(xué)家、免疫學(xué)家、和輸血醫(yī)生合作完成。這個(gè)試驗(yàn)開始時(shí)先將每例患者的部分T細(xì)胞通過類似透析的血漿分離置換法分離出來，然后通過病毒載體的基因工程技術(shù)使細(xì)胞能發(fā)現(xiàn)表達(dá)EGFR Ⅷ的細(xì)胞。接下來將處理的細(xì)胞回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，內(nèi)置信號(hào)域CAR能促進(jìn)這些“獵人”T細(xì)胞。與常規(guī)T細(xì)胞治療時(shí)會(huì)靶向正常細(xì)胞的情況不同，EGFR Ⅷ只存在于腫瘤組織中，以達(dá)到減少不良反應(yīng)的效果。該試驗(yàn)將招募12例腫瘤表達(dá)EGFR Ⅷ的患者，分為兩組，其中6例是接受過其他療法治療但未能收獲理想療效的患者，另外6例是剛剛確診為惡性膠質(zhì)瘤的患者在手術(shù)切除后同時(shí)仍有1 cm或者更多腫瘤組織存留。該研究目前進(jìn)行中。

（編譯 李瑞 審校 盧鈾）