美國研究者Schneider等報(bào)告了一種同時(shí)靶向CD19、CD20和CD22的三特異性CAR-T療法，在治療表達(dá)異質(zhì)性抗原的腫瘤方面具有良好的前景。(Sci Transl Med. 2021, 13: eabc6401. DOI: 10.1126/scitranslmed.abc6401)

表達(dá)嵌合抗原受體(CAR)的T細(xì)胞(CAR-T療法)是近年來腫瘤治療領(lǐng)域的重大突破之一，在治療血液系統(tǒng)腫瘤方面取得成效。隨著靶向CD19和CD22 CAR-T細(xì)胞療法的出現(xiàn)，B細(xì)胞惡性腫瘤的治療有了顯著改善?；颊呓邮蹸AR-T療法后出現(xiàn)疾病復(fù)發(fā)的問題仍未得到有效解決：高達(dá)50%的患者在接受CAR19 T細(xì)胞治療后的第一年內(nèi)出現(xiàn)疾病的復(fù)發(fā)，其中很大一部分患者表現(xiàn)出CD19抗原的丟失。同樣，在CAR22 T細(xì)胞療法治療B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)中的疾病復(fù)發(fā)與腫瘤細(xì)胞表面CD22蛋白的下調(diào)有關(guān)，造成CAR22 T細(xì)胞不再能識(shí)別并殺死腫瘤細(xì)胞。類似的現(xiàn)象在靶向CD20抗原的免疫療法中也有出現(xiàn)。

抗原下調(diào)是導(dǎo)致CAR-T療法耐藥性的重要原因之一，多特異性CAR-T有望克服這一問題。在此前研究中，同時(shí)靶向CD19和CD20以及靶向CD19和CD22的雙特異性CAR-T療法都取得了積極的臨床進(jìn)展。

研究者采取了一種duoCAR的雙分子CAR結(jié)構(gòu)來實(shí)現(xiàn)三特異性CAR-T的目標(biāo)，duoCAR由兩個(gè)嵌合抗原組成，其中一個(gè)是串聯(lián)CD19和CD20的單鏈片段可變區(qū) (scFv) ，另一個(gè)為CD22 scFv。同時(shí)研究者使用了ICOS、OX40或CD27作為共刺激信號(hào)，最終從眾多候選分子中篩選了4種duoCAR結(jié)構(gòu)。此前，采用duoCAR結(jié)構(gòu)的CAT-T療法通過靶向HIV病毒表面特異性蛋白的多個(gè)區(qū)域(膜糖蛋白gp120和gp41)，在人源化小鼠模型中可將受HIV感染的細(xì)胞近乎100%清除。

通過轉(zhuǎn)染，研究者先在T細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了duoCAR結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定表達(dá)，表達(dá)duoCAR的T細(xì)胞與未轉(zhuǎn)染的正常T細(xì)胞相比，未出現(xiàn)自發(fā)激活、耗竭或終末分化等不良反應(yīng)。在體外實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)對腫瘤細(xì)胞時(shí)，新型CAR-T療法能夠穩(wěn)定地分泌多種細(xì)胞因子，包括白細(xì)胞介素-2 (IL-2)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等，最終殺死腫瘤細(xì)胞。

在隨后的小鼠實(shí)驗(yàn)中，三特異性CAR-T療法可以在小鼠體內(nèi)有效地抑制異種移植的白血病和淋巴瘤。此外，在攜帶三陽性(CD19/20/22陽性)、CD19 陰性(CD20/22陽性)、CD20 陰性(CD19/22陽性)和CD22陰性(CD19/20陽性)的B細(xì)胞淋巴瘤的小鼠中，只有三特異性CAR-T 療法快速有效地消除了腫瘤，而每種單抗原CAR-T療法均未能阻止腫瘤的進(jìn)展。三特異性CAR-T療法可以更好地避免腫瘤復(fù)發(fā)，具有更持久的抗腫瘤效果。

CAR-T療法已經(jīng)成為治療血液系統(tǒng)腫瘤的一種熱門療法，但目前在治療表達(dá)異質(zhì)性抗原的癌癥時(shí)仍面臨諸多挑戰(zhàn)，該研究成功構(gòu)建一種成熟的三特異性CAR-結(jié)構(gòu)，在治療表達(dá)異質(zhì)性抗原的腫瘤方面或具有良好的前景。 ` (編譯 劉景新)