美國(guó)哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院Kumar等研究發(fā)現(xiàn)了一種名為CARM1的新腫瘤靶點(diǎn)，CARM1抑制劑不僅自身有抗腫瘤活性，還有提高T細(xì)胞抗腫瘤能力的作用，不僅能影響腫瘤細(xì)胞改善免疫微環(huán)境，還能同時(shí)提高免疫細(xì)胞的抗腫瘤活性，有望與免疫治療聯(lián)用提高免疫療法療效。(Cancer Discov. 2021年3月11日在線版)

在腫瘤細(xì)胞里抑制CARM1的活性，可誘導(dǎo)雙鏈DNA斷裂的水平增加，激活腫瘤細(xì)胞對(duì)DNA損傷反應(yīng)，提高干擾素刺激基因(ISG)的表達(dá)水平，改善腫瘤微環(huán)境，促進(jìn)先天性免疫細(xì)胞的聚集。在殺傷性T細(xì)胞中抑制CARM1的活性，可提高殺傷性T細(xì)胞的活性，以及維持記憶性抗腫瘤T細(xì)胞的水平。意味著，抑制CARM1活性的藥物，單用有抗腫瘤活性，還能提高T細(xì)胞的抗腫瘤能力，可與免疫治療聯(lián)合應(yīng)用。

免疫治療目前只有小部分患者獲益，大部分患者免疫治療無(wú)效或治療后出現(xiàn)耐藥。為進(jìn)一步擴(kuò)大免疫治療的獲益人群，學(xué)界致力于將免疫治療與化療等其他療法聯(lián)合使用，有些聯(lián)合療法已獲得批準(zhǔn)用于臨床。但能從聯(lián)合治療中獲益的仍僅限于小部分患者。化療等殺傷腫瘤細(xì)胞的療法也損害免疫細(xì)胞的生存和功能。

研究者從腫瘤特異性T細(xì)胞中，用CRISPR/Cas9技術(shù)篩選抗腫瘤免疫的負(fù)調(diào)節(jié)因子，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)名為Carm1的基因，Carm1基因編碼的是一種精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶，這種酶可以在組蛋白H3的R17和R26殘基，以及其他核蛋白上添加甲基。研究者在體外敲除了T細(xì)胞的Carm1基因，敲除了Carm1基因的T細(xì)胞對(duì)黑色素瘤細(xì)胞B16F10-Ova的殺傷力更強(qiáng)。在與B16F10-Ova共處一個(gè)培養(yǎng)容器之后，這些T細(xì)胞的CD69活化標(biāo)志物、顆粒酶B細(xì)胞毒性蛋白和細(xì)胞因子IL-2、IFNγ和TNFα的表達(dá)水平更高，表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗原誘導(dǎo)增殖能力，提示Carm1基因是腫瘤特異性T細(xì)胞的負(fù)調(diào)節(jié)因子，敲除Carm1基因后的T細(xì)胞變得更強(qiáng)大了。

小鼠實(shí)驗(yàn)中，Carm1基因被敲除的T細(xì)胞對(duì)黑色素瘤細(xì)胞B16F10-Ova形成的腫瘤，有更強(qiáng)的抑制效果。不僅抗腫瘤活性增加了，進(jìn)入腫瘤的能力也增強(qiáng)了。

研究者進(jìn)行RNA測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)，敲除Carm1基因后，T細(xì)胞中1143個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，1199個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。上調(diào)的基因包括編碼介導(dǎo)T細(xì)胞招募到腫瘤中的趨化因子受體的基因，以及維持記憶T細(xì)胞群所需的關(guān)鍵基因。下調(diào)的基因包括與終末分化、抑制細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)和腫瘤內(nèi)T細(xì)胞功能障礙相關(guān)的基因。

研究者對(duì)來(lái)自1208個(gè)人類癌癥細(xì)胞系的RNA測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)在不同的人類癌細(xì)胞系中都有高水平的Carm1表達(dá)，提示Carm1對(duì)腫瘤細(xì)胞很重要，可能有促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)進(jìn)展的作用。

研究者接下來(lái)用對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑有耐藥性的B16F10黑色素瘤和4T1乳腺癌模型，探索Carm1對(duì)癌細(xì)胞的作用。發(fā)現(xiàn)敲除B16F10和4T1的Carm1基因不影響B(tài)16F10和4T1在體外的增殖和存活，但B16F10和4T1在體內(nèi)的生長(zhǎng)能力大幅減弱。耗竭小鼠體內(nèi)的CD8+ T細(xì)胞，Carm1基因缺失的B16F10和4T1癌細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)能力恢復(fù)。提示腫瘤細(xì)胞中的Carm1失活，刺激了T細(xì)胞介導(dǎo)的強(qiáng)力抗腫瘤免疫。Carm1基因缺失的腫瘤細(xì)胞對(duì)CD8+ T細(xì)胞更敏感，與識(shí)別游離DNA片段的cGAS-STING通路有關(guān)，提示Carm1基因缺失增強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞的DNA損傷反應(yīng)，誘導(dǎo)1型干擾素反應(yīng)，最終導(dǎo)致腫瘤浸潤(rùn)性CD8 T細(xì)胞、NK細(xì)胞和樹枝狀細(xì)胞的數(shù)量大幅增加。通過(guò)對(duì)DNA斷裂位點(diǎn)的熒光標(biāo)記，研究者發(fā)現(xiàn)Carm1基因缺失的癌細(xì)胞存在更多的DNA斷裂，敲除Carm1基因會(huì)導(dǎo)致DNA損傷后細(xì)胞周期抑制失敗，進(jìn)而導(dǎo)致有絲分裂過(guò)程中的染色體分離、微核的形成，cGAS-STING通路被激活。

研究者用CD8+ T細(xì)胞浸潤(rùn)很差的冷腫瘤分別檢驗(yàn)了CARM1抑制劑(EZM2302)單藥治療和聯(lián)合PD-1抑制劑或CTLA-4抑制劑的抗腫瘤效果。CARM1抑制劑單藥表現(xiàn)出一定的抗腫瘤效果，CARM1抑制劑聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑抗腫瘤效果超強(qiáng)。

CARM1抑制劑的使用，可以把冷腫瘤變成熱腫瘤，使耐藥的實(shí)體瘤對(duì)細(xì)胞毒性T細(xì)胞敏感，而且還可以增強(qiáng)T細(xì)胞的記憶和持久性。CARM1抑制劑與免疫治療聯(lián)合應(yīng)用的抗腫瘤效果，值得進(jìn)一步研究探討。

(編譯 劉景新)