美國Dana-Farber癌癥研究所Gullu Topal Gorgun報告指出，多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞和輔助細(xì)胞的相互作用一方面促進(jìn)了腫瘤發(fā)展，一方面使骨髓微環(huán)境轉(zhuǎn)變至適應(yīng)腫瘤生長及免疫抑制狀態(tài)。

靶向治療的最新進(jìn)展提示，最有效的治療策略不僅要針對腫瘤或基質(zhì)細(xì)胞，還需消除對抗腫瘤免疫反應(yīng)的封鎖。腫瘤相關(guān)的免疫抑制細(xì)胞如Treg或骨髓抑制細(xì)胞(MDSC)可有效阻礙抗腫瘤免疫反應(yīng)，因此是免疫治療的主要障礙。共抑制分子程序化細(xì)胞死亡-1(PD-1)及其配合基(PD-L1)通過抑制免疫效應(yīng)子功能在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮重要作用。

既然PD-1/PD-L1可以抑制介導(dǎo)抗腫瘤免疫反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞的功能而促進(jìn)腫瘤生長，在此研究中研究者分析了單獨(dú)阻斷PD-1/PD-L1或與來那度胺聯(lián)合應(yīng)用對輔助細(xì)胞及免疫細(xì)胞功能的影響，以及對多發(fā)性骨髓瘤患者骨髓微環(huán)境中腫瘤細(xì)胞生長的影響。

在IFM MM數(shù)據(jù)庫中對PD-L1基因表達(dá)情況進(jìn)行檢測(170例)。檢測MGUS(3例)、新診斷(5例)、復(fù)發(fā)難治(11例)患者及健康供者(10例)的骨髓和外周血中CD138+MM細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、MDSC細(xì)胞表面PD-L1的表達(dá)，以及效應(yīng)細(xì)胞(CD4T, CD8T, NK, NKT and 單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞)表面PD-1的表達(dá)。在患者骨髓瘤細(xì)胞或骨髓瘤細(xì)胞系與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓抑制細(xì)胞、效應(yīng)細(xì)胞的自體共培養(yǎng)中，加或不加PD-1/PD-L1阻斷劑及來那度胺，然后檢測PD-1/PD-L1的表達(dá)。運(yùn)用流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測來那度胺對效應(yīng)細(xì)胞PD-1表達(dá)以及腫瘤細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓抑制細(xì)胞PD-L1表達(dá)的作用。

通過MTT、3H-Thy及CFSE流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓抑制細(xì)胞導(dǎo)致的骨髓瘤細(xì)胞生長。通過CFSE/PI檢測效應(yīng)細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。通過細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測阻斷PD-1/PD-L1聯(lián)合或不聯(lián)合來那度胺對細(xì)胞因子類型的影響。

研究結(jié)果顯示，統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果證實(shí)與正常人相比骨髓瘤病人的細(xì)胞表達(dá)更多的PD-L1 mRNA。細(xì)胞表面PD-L1表達(dá)在新診斷的骨髓瘤中也有顯著增多，在復(fù)發(fā)難治的骨髓瘤中更多。因此，新診斷及復(fù)發(fā)難治骨髓瘤的CD8 T細(xì)胞及NK細(xì)胞PD-1表達(dá)有顯著增多。另外，新診斷及復(fù)發(fā)難治骨髓瘤中mMDSC和nMDSC的PD-L1表達(dá)顯著高于抗原提呈細(xì)胞的PD-L1表達(dá)。與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的共同培養(yǎng)顯著增加了骨髓瘤細(xì)胞PD-L1的表達(dá)。在患者骨髓瘤細(xì)胞或骨髓瘤細(xì)胞系中阻斷PD-1/ PD-L1可以克服骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞生長。

需要提出的是，來那度胺能夠顯著減少骨髓瘤細(xì)胞PD-L1的表達(dá)，來那度胺聯(lián)合PD-1/ PD-L1阻斷能進(jìn)一步減少骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞生長。在免疫效應(yīng)細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)中可以評估PD-1/ PD-L1阻斷的免疫調(diào)節(jié)作用。雖然效應(yīng)細(xì)胞的數(shù)量沒有擴(kuò)增，但阻斷PD-1/ PD-L1有效增加了與骨髓瘤細(xì)胞共培養(yǎng)中的T細(xì)胞、NK細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，來那度胺進(jìn)一步增強(qiáng)了效應(yīng)細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。阻斷PD-1/ PD-L1促進(jìn)了CD4 T細(xì)胞、CD8 T細(xì)胞、NK細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒性細(xì)胞因子IFNg、顆粒酶B在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。

另外，阻斷PD-1/ PD-L1顯著減少了骨髓抑制細(xì)胞介導(dǎo)的骨髓瘤細(xì)胞生長。最后，阻斷PD-1/ PD-L1導(dǎo)致了與自體骨髓抑制細(xì)胞共培養(yǎng)的T細(xì)胞、NK細(xì)胞、NK T細(xì)胞的IFNg、顆粒酶B在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，來那度胺進(jìn)一步增強(qiáng)了此效應(yīng)細(xì)胞的活性。

研究者的數(shù)據(jù)證明，免疫檢查信號在促進(jìn)腫瘤生長、抑制免疫微環(huán)境中發(fā)揮重要作用。阻斷PD-1/ PD-L1信號可以誘導(dǎo)抗骨髓瘤的免疫反應(yīng)，且可以被雷納度胺加強(qiáng)。應(yīng)用PD-1/ PD-L1阻斷抗體靶向檢查信號，尤其與雷納度胺聯(lián)合，對骨髓瘤病人無論抑制腫瘤生長還是重建免疫功能均是一項(xiàng)有前景的免疫治療策略。

(編譯 王驚華 審校 呂躍)