中國(guó)中山大學(xué)第三附屬醫(yī)院的一項(xiàng)多中心研究，采用回顧性分析及巢氏病例對(duì)照的設(shè)計(jì)方法并驗(yàn)證了一種用于早期診斷小肝癌、早期肝癌、AFP陰性肝癌的血清miRNA分選法，這一研究有望用于早期肝癌的臨床前診斷，為部分肝癌患者提供根治性切除及長(zhǎng)期生存的機(jī)會(huì)。(Lancet Oncol, 2015, 16: 804-815.)

越來(lái)越多的證據(jù)提示，循環(huán)miRNA可作為包括腫瘤在內(nèi)的多種疾病的生物標(biāo)志物，然而大多數(shù)對(duì)循環(huán)miRNA用于肝癌預(yù)測(cè)的報(bào)道均為小樣本，少有的幾項(xiàng)大樣本高通量研究也是回顧性地使用病例對(duì)照方法，未能對(duì)循環(huán)miRNA用于肝癌臨床前檢測(cè)的價(jià)值進(jìn)行驗(yàn)證。

該研究通過(guò)一種miRNA分選法，將幾種miRNA聯(lián)合檢測(cè)用于發(fā)現(xiàn)高危人群的臨床及臨床前狀態(tài)。研究人群來(lái)自中國(guó)4家醫(yī)院的健康對(duì)照人群、未激活的乙肝病毒抗原攜帶者、慢性乙型肝炎患者、乙肝肝硬化患者和肝癌患者，該研究共分成三個(gè)階段。

第一階段，首先采用定量PCR和陣列分析的方法自6例肝癌患者及8例慢性乙型肝炎患者的血清比對(duì)中篩選出肝癌患者血清中含量增高的19種miRNA。在接下來(lái)的第二階段中，采用包含肝癌患者及其他對(duì)照人群的257例的訓(xùn)練集數(shù)據(jù)，建模設(shè)計(jì)出用于檢測(cè)肝癌的包含7種miRNA的分選法(又稱Cmi)(包含miR29a、miR29c、miR133a、miR143、miR145、miR192和miR505)，且在兩個(gè)獨(dú)立的分別包含352例和139例的隊(duì)列人群中進(jìn)行驗(yàn)證，并與AFP以20 ng/ml(AFP20)及40 ng/ml(AFP40)作為截點(diǎn)的檢驗(yàn)效能進(jìn)行比對(duì)。

在第三階段中，該研究通過(guò)設(shè)計(jì)一項(xiàng)包含27例肝癌患者及135例匹配人群的巢氏病例對(duì)照研究進(jìn)一步來(lái)驗(yàn)證這個(gè)miRNA分選法對(duì)肝癌的臨床前預(yù)測(cè)價(jià)值。研究者預(yù)先對(duì)診斷前人群進(jìn)行血清收集，并將在同一隨訪期內(nèi)最終診斷肝癌的人群與未診斷為肝癌的乙肝病毒感染者進(jìn)行匹配，根據(jù)這個(gè)分選法的檢測(cè)敏感性、特異性及受試者操作特征曲線下的面積(AUC)對(duì)miRNA分選法的預(yù)測(cè)價(jià)值進(jìn)行評(píng)估，并與AFP20、AFP40的預(yù)測(cè)價(jià)值相比。

雖然在訓(xùn)練集隊(duì)列中，Cmi并沒(méi)有體現(xiàn)出比AFP20更好的精確性(AUC：0.826 vs 0.814，P=0.72)，但在驗(yàn)證隊(duì)列中，Cmi可顯示出更高的精確性(驗(yàn)證隊(duì)列1中的AUC：0.817 vs 0.709，P=0.00076;驗(yàn)證隊(duì)列2中：0.884 vs 0.796，P=0.042)。

在所有四個(gè)隊(duì)列中(訓(xùn)練隊(duì)列、驗(yàn)證隊(duì)列1、驗(yàn)證隊(duì)列2、巢氏隊(duì)列)，Cmi在診斷肝癌方面都比AFP20具有更高的靈敏度(70.4%～85.7% vs 40.7%～69.4%)，但特異性方面相似(80.0%～91.1% vs 84.9%～100%)。在巢氏病例對(duì)照研究中，Cmi在肝癌臨床診斷前12個(gè)月的檢測(cè)敏感性是29.6%(8/27例)，臨床診斷前9個(gè)月的檢測(cè)敏感性為48.1%(13例)，6個(gè)月臨床前診斷的檢測(cè)敏感性為48.1%(13/27例)，臨床診斷前3個(gè)月的檢測(cè)敏感性為55.6%(15/27例)，而AFP20在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的檢測(cè)敏感性分別為7.4%(2/27例)、11.1%(3/27例)、18.5%(5/27例)、22.2%(6/27例)，兩種方法在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)比的統(tǒng)計(jì)學(xué)P值分別為0.036、0.0030、0.021和0.012。

無(wú)論在檢測(cè)小肝癌或是早期肝癌方面，Cmi的ROC曲線下面積都比AFP20大(小肝癌檢測(cè)的AUC：0.833 vs 0.727，P=0.0018;早期肝癌檢測(cè)：0.824 vs 0.75，P=0.015)，Cmi還可以用于檢測(cè)AFP陰性的肝癌(AUC：0.825)。

(編譯 王韻 審校 李宇紅)

中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院 李宇紅教授述評(píng)：

本研究通過(guò)外周血microRNA的聯(lián)合檢測(cè)，旨在癌前病變階段就可以更加早期診斷出原發(fā)性肝癌患者，結(jié)果證實(shí)其在敏感性方面優(yōu)于傳統(tǒng)的AFP20，這一研究結(jié)果將有望用于肝癌的臨床前診斷。但該研究第三階段用于驗(yàn)證的研究例數(shù)偏少，需要進(jìn)一步擴(kuò)大例數(shù)以證實(shí)其結(jié)果的可靠性。另外，該研究人群主要來(lái)自中國(guó)患者，多為HBV感染相關(guān)，因此其結(jié)果是否適用于其他人種的患者，也需要進(jìn)一步證實(shí)。