瑞士洛桑大學(xué)Ho等研究發(fā)現(xiàn)，抑制CD36可阻斷調(diào)節(jié)T細(xì)胞對腫瘤微環(huán)境的適應(yīng)，增強(qiáng)抗腫瘤活性。(Nat Immunol. 2020; 21: 298-308. doi: 10.1038/s41590-019-0589-5)

研究者發(fā)現(xiàn)，CD36表達(dá)增加是一種重要的代謝響應(yīng)，讓調(diào)節(jié)性T細(xì)胞能適應(yīng)高乳酸水平的腫瘤微環(huán)境，促進(jìn)了調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中的存活和聚集。通過單克隆抗體等方法阻斷CD36后，腫瘤內(nèi)的浸潤的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞減少，殺傷性T細(xì)胞則明顯增加，在不破壞全身的免疫穩(wěn)態(tài)的前提下，抑制腫瘤的生長。阻斷CD36還可以和抗PD-1治療聯(lián)合使用，進(jìn)一步增強(qiáng)對腫瘤的殺傷作用。

殺傷性T細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是一對搭檔，殺傷性T細(xì)胞對病原體和異常細(xì)胞發(fā)揮殺傷作用的同時(shí)，是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞保障它不會傷害健康細(xì)胞。但有時(shí)候調(diào)節(jié)性T細(xì)胞也會干壞事。

有研究發(fā)現(xiàn)，殺傷性T細(xì)胞在腫瘤中的浸潤會激活一些免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，把調(diào)節(jié)性T細(xì)胞也招募到腫瘤中，抑制自己殺滅癌細(xì)胞。若能靶向抑制腫瘤中的這些調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，或可使殺傷性T細(xì)胞更好地發(fā)揮對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，提高抗腫瘤免疫能力。

通過分析乳腺癌患者中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的基因表達(dá)特征，對比腫瘤中浸潤的和外周循環(huán)中的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞差異，探討調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在腫瘤微環(huán)境中的存活機(jī)制。研究者發(fā)現(xiàn)，兩類調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的參與脂質(zhì)代謝的基因表達(dá)差異很明顯，其中就包括CD36，它調(diào)控脂質(zhì)的攝取，在腫瘤浸潤的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞中，CD36的表達(dá)水平更高。除了乳腺癌患者，研究者在人肺癌細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞體外模型，以及黑色素瘤和腸癌小鼠模型中均發(fā)現(xiàn)了這一現(xiàn)象。

接下來，研究者對CD36表達(dá)水平的影響進(jìn)行了研究。研究者構(gòu)建了調(diào)節(jié)性T細(xì)胞特異性CD36缺陷型小鼠，與普通小鼠相比，兩者全身的免疫穩(wěn)態(tài)性并無差異，效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞的比例也相似。分析發(fā)現(xiàn)，缺少CD36不會影響T細(xì)胞激活標(biāo)志物，包括CD44、CD103和殺傷細(xì)胞凝集素樣受體G1的表達(dá)，以及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的標(biāo)志性分子Foxp3的表達(dá)。

唯一不同的是，腫瘤內(nèi)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞缺少CD36后，細(xì)胞表面標(biāo)志物GITR和OX40表達(dá)減少，PD-1、CD25和CTLA-4則沒有表達(dá)減少，提示CD36的表達(dá)調(diào)節(jié)效應(yīng)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的抑制功能。

腫瘤內(nèi)促炎細(xì)胞因子干擾素-γ(INF-γ)和腫瘤壞死因子(TNF)的水平明顯增加，這也說明，CD36抑制了腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子的能力，它們是介導(dǎo)免疫反應(yīng)的重要因子。

這些結(jié)果提示，CD36不是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞維持全身免疫穩(wěn)態(tài)的必需分子，它僅是腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的抑制功能所必需的。在實(shí)驗(yàn)中，研究者還發(fā)現(xiàn)，CD36缺失不但影響了腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的功能，還減少了它們在腫瘤中的聚集。

熒光染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CD36缺失并不影響腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的增殖，但促進(jìn)了細(xì)胞的凋亡。過去研究發(fā)現(xiàn)，線粒體代謝和適應(yīng)性調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的抑制功能和生存，因此，研究者分析了這些細(xì)胞中線粒體的情況。

研究者發(fā)現(xiàn)，與普通小鼠或者是缺失CD36的外周調(diào)節(jié)性T細(xì)胞相比，缺失CD36的腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的線粒體膜電位下降，這一現(xiàn)象已經(jīng)被證明會在細(xì)胞凋亡早期就開始出現(xiàn)。電子顯微鏡觀察也顯示，這些細(xì)胞中線粒體數(shù)量更少，每個(gè)線粒體的線粒體嵴也更少(能量需求大的細(xì)胞線粒體嵴數(shù)量多)。除此之外，細(xì)胞的耗氧率降低，糖酵解速率提高，提示缺失CD36導(dǎo)致氧化磷酸化受損，細(xì)胞的代謝向糖酵解傾斜。

據(jù)此，研究者推測，腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的CD36表達(dá)增加可能是通過調(diào)節(jié)線粒體適應(yīng)性來響應(yīng)腫瘤微環(huán)境，改變了代謝途徑，幫助調(diào)節(jié)性T細(xì)胞更好地生存。隨后的實(shí)驗(yàn)證實(shí)了這一推測。

CD36是如何調(diào)節(jié)這種代謝適應(yīng)性的改變的，研究者發(fā)現(xiàn)，腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞參與PARP通路的基因表達(dá)增加，而CD36可通過線粒體激活因子PARP-β和PARP-γ依賴性的方式增強(qiáng)對線粒體活性的調(diào)節(jié)，來改變代謝。

經(jīng)過逐一實(shí)驗(yàn)，研究者將目標(biāo)鎖定在PARP-β上。PARP-β途徑的激活使得腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞線粒體膜電位增加，凋亡減少，在不缺失CD36的情況下，PARP-β的激活還增強(qiáng)了CD36的表達(dá)，進(jìn)一步提高了腫瘤內(nèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的代謝適應(yīng)。

最后，研究者制備了靶向CD36的單克隆抗體，并對黑色素瘤小鼠進(jìn)行了治療。腫瘤中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的水平降低，殺傷性T細(xì)胞的浸潤增加，顯著抑制了腫瘤的生長。

另外，腫瘤中殺傷性T細(xì)胞的耗竭也是常出現(xiàn)的問題。因此，單獨(dú)抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞可能不夠，研究者嘗試同時(shí)阻斷CD36和PD-1，對腫瘤的殺傷作用果然更好，延長了小鼠的存活期。

該研究表明，腫瘤中的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在代謝方面異于其他調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，使它們能更好地適應(yīng)腫瘤微環(huán)境，并在其中扼制殺傷性T細(xì)胞發(fā)揮功能，而這一切都是CD36賦予的，靶向抑制CD36，或可成為新的抗癌療法或是輔助抗腫瘤療法。

(編譯 張樺)