美國俄勒岡健康與科學(xué)大學(xué)Montoya Mira等報告了一種基于基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）敏感性多肽探針開發(fā)的篩查工具——PAC-MANN（全稱為基于蛋白酶活性的磁性納米傳感器測試），僅需檢測患者8 μL的血清樣本，即可在45分鐘時間內(nèi)，以79%的準(zhǔn)確率區(qū)分出胰腺癌與健康對照人群，每次篩查成本僅約1美分。（Sci Transl Med. 2025年2月12日在線版）

研究者使用有較高目標(biāo)敏感性的電荷改變蛋白酶（CCP）分析（檢測蛋白酶被酶切時的電荷由負(fù)變正），設(shè)計了由12種多肽探針組成的初步檢測Panel，分析6例胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）患者與6名健康對照者的血樣，以篩選合適的可用探針，共獲得6個可用探針的Panel（包含37個蛋白酶酶切位點）進入下一步評估測試。

研究者對PDAC/慢性胰腺炎/胰腺瘤變（包括胰腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀黏液瘤和胰腺癌前病變）和健康對照者血清樣本使用探針進行了分析。結(jié)果顯示，所有探針均可顯著區(qū)分PDAC與健康對照者的血樣，可將PDAC與胰腺瘤變和炎癥區(qū)分開；以篩查早期胰腺癌為目標(biāo)時，僅探針1可區(qū)分Ⅰ期PDAC與健康對照，所有探針均可區(qū)分Ⅱ~Ⅳ期患者與健康對照。

進一步對探針檢測的目標(biāo)進行分析，研究者發(fā)現(xiàn)MMP可能是對探針影響最明顯的蛋白酶，有9種MMP家族成員能酶切一個乃至多個探針，抑制MMP2對檢測的影響較突出，PDAC患者和健康對照人群的外周血MMP2水平存在顯著差異。MMP2等少數(shù)幾個蛋白酶對篩查效能有關(guān)鍵性作用，進一步評估測試后，研究者決定僅使用效能相對最高的多肽探針1作為PAC-MANN篩查工具。

為適應(yīng)大規(guī)模篩查需求，PAC-MANN工具在探針1基礎(chǔ)上使用磁性納米傳感器進一步優(yōu)化。完成工具設(shè)計后，研究者使用一項回顧性外部研究進行獨立驗證，PAC-MANN可有效區(qū)分PDAC與非PDAC（健康對照、胰腺炎和胰腺瘤變）血樣，AUC值達(dá)0.91，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)CA19-9檢測（AUC 0.77），二者聯(lián)用可將AUC提高至0.94。

盲法驗證結(jié)果表明，PAC-MANN檢測驗證胰腺癌的準(zhǔn)確性為90%，單獨檢測CA19-9準(zhǔn)確性為79%，二者聯(lián)合準(zhǔn)確性提高至93%，其中對Ⅰ期和Ⅱ期PDAC的檢測敏感性分別為85%和81%，具有較強的檢出效能。當(dāng)敏感性設(shè)置為90%時，PAC-MANN可正確識別91%的PDAC病例、68%的非PDAC病例，表現(xiàn)均優(yōu)于檢測CA19-9，其中對CA19-9水平低的患者（<37 U/ml），PAC-MANN正確識別率為79%。

使用既往回顧性研究胰腺癌數(shù)據(jù)進行了驗證，PAC-MANN識別各分期胰腺癌的特異性與靈敏性分別達(dá)98%和73%，也可100%區(qū)分胰腺癌與其他非癌性胰腺疾病。PAC-MANN與CA19-9檢測聯(lián)合使用，可進一步提高檢測敏感性，檢測Ⅰ期胰腺癌的敏感性可達(dá)85%，該檢測有望成為胰腺癌快速準(zhǔn)確的篩查策略。

該研究中PAC-MANN表現(xiàn)的篩查效能較既往研究有很大進步，研究者計劃嘗試進一步提升檢測敏感性，達(dá)到大規(guī)模篩查的門檻，并計劃啟動相關(guān)臨床研究，篩查一次的低費用使其推進起來可能不太難，期待屆時更多癌癥之王被早篩出來。 

 （編譯 王悅寧）