北京大學生物醫(yī)學前沿創(chuàng)新中心（BIOPIC）張澤民等，使用scRNA/TCR-seq對非小細胞肺癌新輔助治療后樣本進行了單細胞RNA和T細胞受體（TCR）測序，系統(tǒng)解析了非小細胞肺癌患者新輔助治療后免疫微環(huán)境異質(zhì)性，分析了微環(huán)境異質(zhì)性與治療反應和長期生存的關系，揭示了未達到主要病理學緩解患者的耐藥機制，開發(fā)了精準預測患者復發(fā)風險的生物學標志物，為非小細胞肺癌的精準免疫治療提供了重要的參考和指導。（Cell. 2025年3月19日在線版）

近年來，免疫檢查點抑制劑聯(lián)合化療的新輔助治療方案為非小細胞肺癌患者帶來新的治療選擇，但患者對治療的反應存在差異，40%的患者治療反應較低且耐藥機制不明，部分患者在治療后出現(xiàn)復發(fā)，缺乏識別高復發(fā)風險人群的生物學標志物。傳統(tǒng)認為的腫瘤突變負荷、PD-L1表達水平不能較好地預測治療反應，近年來研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤免疫微環(huán)境的組成及功能異質(zhì)性可影響免疫治療效果。

研究者前瞻性隨訪了334例組織學確診的非小細胞肺癌患者，其中245例鱗癌和89例腺癌?；颊呓邮芰丝筆D-1療法聯(lián)合鉑類化療及腫瘤切除術，研究者對其中234例手術切除腫瘤樣本進行了scRNA/TCR-seq分析，獲得腫瘤浸潤免疫細胞的高質(zhì)量單細胞圖譜。

根據(jù)患者腫瘤中不同免疫細胞亞型的相對豐度對患者進行聚類，識別了5類腫瘤免疫微環(huán)境亞型：TIME-NK（富集FGFBP2+ NK細胞的高響應性亞型），樣本富含F(xiàn)GFBP2+ NK細胞和NK樣CD8+ T細胞；TIME-BE（富集B細胞與三級淋巴結構的高響應性亞型），樣本記憶B細胞高度浸潤，形成三級淋巴結構；TIME-Teff（富集效應T細胞的高反應亞型），效應記憶T細胞和組織駐留記憶T細胞占主導地位；TIME-Treg（富集Treg與終末耗竭T細胞的低響應亞型），CCR8+ Treg和增殖性Tregs顯著增加；TIME-Mye（富集髓系細胞的低響應亞型），髓系細胞，如巨噬細胞、樹突細胞占主導地位。

其中，TIME-NK亞型在免疫治療聯(lián)合化療的響應者中富集，這一分型患者大多達到主要病理學緩解（MPR），為所有分型中最高。而非MPR患者中有近半數(shù)表現(xiàn)為TIME-Treg亞型，提示了Treg富集與低緩解率的相關性。

FGFBP2+ NK細胞不僅在接受免疫治療聯(lián)合化療的響應者中富集，還在僅接受新輔助化療的響應者中富集。此外，F(xiàn)GFBP2+ NK樣T細胞表現(xiàn)為高度克隆擴增的狀態(tài)，且不表達PDCD1基因，提示FGFBP2+ NK細胞可能通過不同于經(jīng)典CD8+ T細胞的方式對腫瘤進行殺傷。體外實驗觀察到NK細胞能殺傷化療處理后進入壓力狀態(tài)的惡性腫瘤細胞系，提示FGFBP2+ NK細胞在化療響應中的功能。傳統(tǒng)觀點認為，化療主要通過腫瘤死亡與抗原釋放促進免疫治療療效的提高，該研究觀察到化療也可激活一部分NK細胞對腫瘤進行直接殺傷。

研究者還對T細胞進行了T細胞受體（TCR）克隆擴增方面的深度分析，識別了兩類具有潛在不同耐藥機制的non-MPR患者。一類是調(diào)節(jié)性T細胞高（Treg-hi）型，患者同時具有較高數(shù)量的耗竭T細胞（Tex）和CCR8+ Treg細胞，提示治療響應性低與高度免疫激活伴隨的免疫抑制具有相關性；另一類是調(diào)節(jié)性T細胞低（Treg-low）型，患者Tex相關的克隆數(shù)目較少、擴增程度較低，提示這類型患者的免疫激活不足。提示Treg高患者可能需要針對Treg進行聯(lián)合治療，而Treg低患者可能受益于增強Tex細胞的策略。此外，耗竭T細胞前體（Texp）豐度能較好地預測患者術后復發(fā)風險，該指標預測能力顯著高于傳統(tǒng)的病理學緩解率。這一發(fā)現(xiàn)有助于指導臨床術后識別高復發(fā)風險患者，指導患者后續(xù)輔助治療。

該研究系統(tǒng)性地闡釋了非小細胞肺癌患者在新輔助免疫治療聯(lián)合化療后的免疫微環(huán)境異質(zhì)性，識別了患者在耐藥機制方面的潛在差異?；谶@些發(fā)現(xiàn)，研究者還開發(fā)了預測患者復發(fā)風險的潛在生物學標志物，具有一定的基礎研究與臨床轉(zhuǎn)化價值。

（編譯 張俊熙）