西湖大學(xué)周挺等研究，首次揭示重要的抗原呈遞細胞——樹突狀細胞（DCs）從腫瘤向腫瘤引流淋巴結(jié)的遷移能力，會隨腫瘤進展被逐步抑制，從而削弱DCs對腫瘤特異性T細胞的致敏、使進入腫瘤微環(huán)境的T細胞減少，導(dǎo)致免疫逃逸；西地那非可破解這種不利影響。（Nature. 2025年6月25日在線版）

研究發(fā)現(xiàn)，西地那非可抑制的磷酸二酯酶5（PDE5）及其降解底物環(huán)磷酸鳥苷（cGMP），是調(diào)控樹突狀細胞遷移功能的關(guān)鍵：cGMP可增強肌球蛋白Ⅱ活性來提升樹突狀細胞骨架的收縮能力，使它們的變形遷移能力更強，但晚期癌癥會通過減少一氧化氮（NO）合成，抑制cGMP關(guān)鍵合成酶的活性來進行反制；而使用西地那非抑制PDE5，則能通過減少cGMP降解，恢復(fù)樹突狀細胞向腫瘤引流淋巴結(jié)的遷移能力，維持有效的抗腫瘤免疫應(yīng)答。

在免疫系統(tǒng)抗擊癌癥的戰(zhàn)場上，樹突狀細胞是非常重要的存在，它們要將腫瘤抗原信息帶回腫瘤引流淋巴結(jié)，才能協(xié)調(diào)和指揮T細胞大軍出擊。但樹突狀細胞回到腫瘤引流淋巴結(jié)不是瞬移，而是要經(jīng)淋巴管遷移。從腫瘤微環(huán)境到腫瘤引流淋巴結(jié)的遷移過程為遷移型常規(guī)樹突細胞提供了進一步成熟的時空條件，但也成為腫瘤可利用的免疫逃逸薄弱環(huán)節(jié)。

當(dāng)樹突狀細胞穿越組織時，其運動能力動態(tài)響應(yīng)環(huán)境中的生化信號和物理信號。在紊亂的腫瘤微環(huán)境中，這些信號往往發(fā)生畸變，導(dǎo)致樹突狀細胞遷移運動受阻，進而引發(fā)抗腫瘤免疫應(yīng)答失靈，幫助腫瘤免疫逃逸。

為探討樹突狀細胞遷移能力下降的分子機制，研究者采用體內(nèi)CRISPR篩選系統(tǒng)，在體外敲除樹突狀細胞中的不同基因，將這些細胞注射到小鼠腫瘤周圍區(qū)域，觀察哪些基因被敲除后能讓樹突狀細胞重新活躍起來，遷移到淋巴結(jié)。篩選發(fā)現(xiàn)PDE5及其底物cGMP是調(diào)控樹突狀細胞運動能力的重要因子。

研究者首先分析了30余例晚期腫瘤患者（含胰腺癌、乳腺癌和結(jié)腸癌）的前哨淋巴結(jié)，發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)內(nèi)主要負責(zé)呈遞抗原的遷移性常規(guī)樹突狀細胞（mig-cDCs）數(shù)量僅為早期腫瘤患者的1/3到1/2，在淋巴結(jié)內(nèi)分布也更稀疏，它們攜帶的腫瘤抗原數(shù)量也較少，激活抗原特異性T細胞的能力較弱，而非引流淋巴結(jié)中無類似現(xiàn)象。

研究者進行了兩輪CRISPR篩選，尋找可能抑制mig-cDCs遷移能力的通路。篩選發(fā)現(xiàn)PDE5及其底物cGMP是調(diào)控樹突狀細胞運動能力的核心分子，敲除遷移型常規(guī)樹突狀細胞的Pde5后，它們能更多地進入淋巴管并遷移到腫瘤引流淋巴結(jié)，激活更多T細胞抵達腫瘤部位，而它們未敲除Pde5的同類則滯留在腫瘤內(nèi)，無法調(diào)動T細胞前來。

根據(jù)PDE5降解cGMP的生理功能，研究者籍此進一步明確PDE5影響mig-cDCs遷移能力的具體機制。在模擬遷移場景的3D膠原凝膠模型中，來自晚期腫瘤的樹突狀細胞的遷移能力明顯下降，但這與樹突狀下?lián)艿闹饕吇蜃有盘朇CR7表達無關(guān)，是樹突狀細胞本身的因素導(dǎo)致它們難以移動，而敲除Pde5或補充cGMP，能恢復(fù)樹突狀細胞的遷移能力。

PDE5或cGMP所調(diào)控的是樹突狀細胞的變形遷移能力，樹突狀細胞有類似阿米巴原蟲的偽足，可按相似的方式伸縮來進行運動；cGMP則可通過非經(jīng)典途徑（如RhoA–ROCK–MLC信號軸）增強肌球蛋白-Ⅱ活性，上調(diào)樹突狀細胞的骨架收縮能力，使其更容易經(jīng)變形遷移方式運動。

研究者發(fā)現(xiàn)，晚期腫瘤會主動破壞樹突狀細胞內(nèi)的cGMP合成，從而抑制其遷移能力。通過降低cGMP水平，腫瘤細胞使驅(qū)動樹突狀細胞運動的分子機器失活，切斷了腫瘤與免疫系統(tǒng)間的通訊連接。晚期腫瘤并非通過上調(diào)樹突狀細胞中的PDE5表達來降低cGMP水平，而是通過減少cGMP的生產(chǎn)原料，下調(diào)一氧化氮合酶（NOS2）表達、減少腫瘤微環(huán)境內(nèi)的NO含量，導(dǎo)致調(diào)控cGMP合成的可溶性鳥苷酸環(huán)化酶（sGC）活性下降，cGMP合成受阻，cGMP少了，樹突狀細胞動不起來。

3D膠原凝膠遷移實驗顯示，來自晚期腫瘤的樹突細胞遷移速度和持續(xù)性明顯低于早期腫瘤組。通過添加cGMP類似物或基因敲除PDE5以提高細胞內(nèi)cGMP水平，可恢復(fù)這些細胞的運動能力。

研究者對Pde5抑制劑西地那非的抗腫瘤潛力進行了系統(tǒng)評估。發(fā)現(xiàn)西地那非能顯著提高樹突細胞的運動能力，這一作用在小鼠和人類樹突狀細胞中均得到驗證。使用西地那非抑制PDE5功能，通過減少降解來穩(wěn)住cGMP水平，讓樹突狀細胞重新動起來，相應(yīng)改善T細胞的激活狀態(tài)。

多種小鼠模型中，西地那非治療能顯著提升晚期腫瘤中淋巴管的樹突細胞含量，淋巴結(jié)中的樹突細胞數(shù)量恢復(fù)到早期腫瘤水平。這些重新活躍的樹突細胞有效激活了T細胞反應(yīng)，增加了腫瘤中TCF1⁺干細胞樣CD8⁺ T細胞和功能性T細胞的數(shù)量。這些結(jié)果表明，西地那非治療不僅顯著提高tdLNs中樹突狀細胞的數(shù)量，還增強T細胞的活化狀態(tài)。

實驗顯示，西地那非可通過抑制PDE5增強樹突狀細胞的遷移能力，進而上調(diào)T細胞的增殖能力和激活狀態(tài)，使它們更有效地抑制腫瘤生長；在小鼠實驗中，西地那非聯(lián)合PD-1抑制劑更能協(xié)同增效，使80%小鼠的腫瘤被“治愈”、腫瘤完全消失。在免疫原性較差的B16F10黑色素瘤模型中，聯(lián)合治療使20%的小鼠達到完全緩解，療效顯著優(yōu)于任一單藥；而在MC38^-Pde5^-/-結(jié)腸癌小鼠模型中，治愈率高達80%。這些治愈的小鼠甚至能抵抗后續(xù)更高劑量的腫瘤再次攻擊，提示形成了長期免疫記憶。

該研究揭示了腫瘤通過干擾樹突細胞運動能力來逃避免疫監(jiān)視的新機制，并證實了通過PDE5-cGMP軸恢復(fù)這種能力的治療潛力。這種通過恢復(fù)樹突狀細胞遷移功能來增強抗原呈遞的策略，與現(xiàn)有的免疫檢查點抑制劑形成互補，為聯(lián)合治療提供了新策略。研究者認為，既往使用西地那非治療癌癥的臨床研究收效有限，可能是由于用藥劑量不足，加大劑量、延長給藥時間或是優(yōu)化方案。

（編譯 張瑞軒）