美國研究者Hunter等開發(fā)了一種體內(nèi)CAR-T細(xì)胞工程策略，該技術(shù)核心是使用靶向脂質(zhì)納米顆粒（tLNPs）將信使RNA（mRNA）遞送至特定的T細(xì)胞亞群，讓mRNA來表達(dá)特定的CAR。與傳統(tǒng)DNA載體不同，mRNA不會整合到宿主基因組中，從而避免了長期遺傳改變的風(fēng)險，提高了治療的安全性。（Science. 2025, 388: 1311）

研究者設(shè)計了一種名為L829的新型可離子化脂質(zhì)顆粒，它解決了傳統(tǒng)脂質(zhì)納米顆粒面臨的主要挑戰(zhàn)——肝臟網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吸收問題。與傳統(tǒng)脂質(zhì)顆粒相比，L829可有效避開肝臟的過濾系統(tǒng)、肝臟吸收率顯著減低，并表現(xiàn)出更精確的T細(xì)胞遞送。

在肝臟減少吸收的優(yōu)勢下，L829能迅速且有效地前往脾臟、骨髓等T細(xì)胞聚集的地方。研究者重點關(guān)注了CD8+ T細(xì)胞亞群的特異性靶向，這類T細(xì)胞具有很強的腫瘤殺傷性，因此是優(yōu)先改造目標(biāo)。

小鼠實驗中，研究者將CD8抗體與L829脂質(zhì)顆粒結(jié)合，讓該工具優(yōu)先在CD8+ T細(xì)胞中積累。觀察結(jié)果顯示，CD8-L829-tLNP能在血液、脾臟、骨髓和淋巴結(jié)中快速（24小時內(nèi)）改造CD8+ T細(xì)胞。

在確認(rèn)這一策略有效后，研究者后續(xù)給脂質(zhì)顆粒載體設(shè)計了合適的mRNA序列，主要用于表達(dá)CD19 CAR。CD19在B細(xì)胞惡性腫瘤和自身免疫病中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，比如急性B淋巴細(xì)胞白血病中，超過90%的病例都高度表達(dá)CD19。該脂質(zhì)顆粒載體可有效地幫助CD8+ T細(xì)胞產(chǎn)生尋找CD19的“探測器”，在體內(nèi)構(gòu)建出靶向CD19的CAR-T細(xì)胞。

在普通小鼠模型中，單次注射脂質(zhì)顆粒6小時后，CD8+ T細(xì)胞中的CAR表達(dá)即可達(dá)到峰值；24小時內(nèi)，小鼠脾臟中的B細(xì)胞被大量清除。在白血病小鼠模型中，研究者待腫瘤細(xì)胞生長一定時間后，為小鼠注射了脂質(zhì)顆粒。研究者發(fā)現(xiàn)小鼠每周接受兩次治療，持續(xù)2周后，即能顯著控制腫瘤生長。劑量更高的實驗組中，甚至有小鼠出現(xiàn)了腫瘤完全清除。

研究者在獼猴中重復(fù)了驗證實驗，結(jié)果同樣顯示該策略可以有效誘導(dǎo)B細(xì)胞的清除。治療結(jié)束后，B細(xì)胞數(shù)量會逐漸恢復(fù)，不會長期對獼猴的免疫系統(tǒng)造成破壞。提示該策略能在治療期間有效發(fā)揮作用，且具備較高的安全性。

該研究展示的體內(nèi)CAR-T生成技術(shù)，有望幫助簡化制造過程、降低成本、提高可及性，使更多患者受益。除了幫助應(yīng)對腫瘤，新技術(shù)還能為自身免疫性疾病患者提供一種變革性的治療選擇，在不需要長期免疫抑制的情況下幫助患者實現(xiàn)疾病緩解。

（編譯 張瑞軒）