1. 流式細(xì)胞儀平臺儀器如下：

●BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分選型流式細(xì)胞儀，配備有633nm laser, 488nm laser 和 355nm UV laser

●BD Accuri C6 分析型流式細(xì)胞儀，配備有488nm laser 和 633nm laser.

2. 流式細(xì)胞儀平臺軟件如下：

 ●FlowJo 7.6.5 ● ModiFit 4.0

●BD FACSDiva 6.1.3 ● CFlow plus

3. 為保證大型高精度實(shí)驗(yàn)儀器的順利運(yùn)行，本平臺實(shí)行專人負(fù)責(zé)操作、維護(hù)及管理。儀器負(fù)責(zé)人需通過該平臺儀器的專業(yè)培訓(xùn)并獲相關(guān)資質(zhì)方可上機(jī)操作。

4. 本平臺實(shí)行儀器使用登記制度，紀(jì)錄儀器使用日期、儀器狀態(tài)、使用參數(shù)、檢測樣本量、使用人及儀器負(fù)責(zé)人。

5. 儀器原則上每周一至周五全天開放。

6. 儀器負(fù)責(zé)人應(yīng)維持流式細(xì)胞儀及周圍環(huán)境的潔凈，實(shí)驗(yàn)后需清洗機(jī)器管道、每周需清洗流動室、定期需更換儀器濾器、濾膜等，定期清空廢液桶，長期檢測機(jī)器控制、監(jiān)督公司定期維護(hù)等。

7. 申請使用流式細(xì)胞儀平臺請?zhí)崆?周到中心實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)取申請表填寫，主任簽字后交回。申請過程：經(jīng)院學(xué)委會同意后—索取申請單—填寫申請表—課題負(fù)責(zé)人簽字—中心實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人審核。樣品檢測需提前預(yù)約。申請人需認(rèn)真查看“送樣須知”后填寫“使用申請單”，注明申請單位及科室以及課題名稱等，并附樣品來源、熒光素名稱、細(xì)胞數(shù)量及實(shí)驗(yàn)相關(guān)信息。(“使用須知”及“使用申請單”可在預(yù)約時找平臺負(fù)責(zé)人領(lǐng)取)

8.數(shù)據(jù)管理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果以刻錄光盤形式發(fā)送，本平臺只保存實(shí)驗(yàn)結(jié)果六個月;第三方軟件的分析結(jié)果可以通過E-mail形式發(fā)送。

9. 實(shí)驗(yàn)中每次實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)者請不要超過2人，無關(guān)人員請不要私自進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室;實(shí)驗(yàn)結(jié)束后有義務(wù)通知下一個預(yù)約者，以盡量減少儀器開機(jī)空置時間。

10.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，認(rèn)真填寫實(shí)驗(yàn)登記并簽字。

聯(lián)系人：劉錫娟 丁慧榮

聯(lián)系電話：88196715

地址：科研樓612 室

附：

流式細(xì)胞儀平臺使用須知

1. BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分選型流式細(xì)胞儀

BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分選型流式細(xì)胞儀是是BD公司生產(chǎn)的3激光9色多色流式系統(tǒng)兼具分析和分選雙向功能的臺式機(jī)，適用于臨床和基礎(chǔ)的科研需要。BD FACSAria Ⅱ具有高靈敏度、高分辨率、高分選精度和高速度分選的特點(diǎn)，同時因?yàn)樘厥舛ㄖ?，配備?55nm激光，所以可以完成SP及其它紫外激光激發(fā)的熒光素標(biāo)記的細(xì)胞的分析和分選。

主要用途：

●SP細(xì)胞分析及分選

●腫瘤干細(xì)胞分析及分選

●96孔板單個細(xì)胞分選

●GFP標(biāo)記細(xì)胞分選

●紫外激光激發(fā)的熒光素標(biāo)記的分析及分選

●多至9色的多色分析和分選

2. BD Accuri C6 分析型流式細(xì)胞儀

BD Accuri C6 分析型流式細(xì)胞儀配備有一根藍(lán)激光器 (488nm) 和一根紅激光器 (640nm)，具有以下特點(diǎn)：①其數(shù)據(jù)數(shù)字采集具有跨越7個數(shù)量級的動態(tài)范圍 (1600萬道的數(shù)值化數(shù)據(jù)解析度)，保證所有數(shù)據(jù)總是有效可用的，不會在收集過程中發(fā)生丟失數(shù)據(jù)。②它的操作軟件是開放式的，可以裝到每一位使用人的電腦上，在事后對收好的數(shù)據(jù)進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化，以得到更為精確的分析結(jié)果。③可以使用多種類型的樣品管，包括任何品牌的12×75mm管和普通1.5ml和2.0ml EP管。

主要用途：

●細(xì)胞周期檢測

●細(xì)胞增殖檢測

●細(xì)胞凋亡檢測

●線粒體膜電位檢測(JC-1染色)

●腫瘤干細(xì)胞分析

●納米材料細(xì)胞吞噬的檢測

●細(xì)胞鈣流檢測

●CBA(Cytometric Beads Array)實(shí)驗(yàn)

●ROS(reactive oxygen species)檢測實(shí)驗(yàn)

●細(xì)胞膜、漿及核中蛋白因子及抗原的檢測

FlowJo7.6.5軟件

隨著流式細(xì)胞技術(shù)在科研工作中的應(yīng)用愈加廣泛和常規(guī)化，科研工作者對流式細(xì)胞技術(shù)數(shù)據(jù)結(jié)果的分析需求和呈現(xiàn)方式越來越高，尤其是在文章發(fā)表或會議報告中愈發(fā)要求其客觀、直觀和美觀。為滿足這一需求，經(jīng)過前期調(diào)研和分析，中心實(shí)驗(yàn)室流式細(xì)胞儀平臺遴選出一款流式細(xì)胞術(shù)第三方分析軟件FlowJo。FlowJo是TreeStar, San Carlos,CA公司開發(fā)的一款由生物科學(xué)家研發(fā)的兼容多種電腦操作系統(tǒng)的流式數(shù)據(jù)分析軟件，是各高影響力科學(xué)期刊使用最多的分析軟件，逐漸被視為流式研究分析領(lǐng)域的金標(biāo)準(zhǔn)。

主要用途

可以對FACSAria Ⅱ和Accuri C6流式細(xì)胞儀檢測輸出數(shù)據(jù)以及任何流式細(xì)胞儀輸出的FCS 3.0數(shù)據(jù)進(jìn)行二次分析，比如動力曲線呈現(xiàn)，峰圖的疊加及立體呈現(xiàn)等等。

ModiFit軟件

ModiFit 4.0是美國Verity Software House公司開發(fā)的專用于周期分析的流式第三方軟件。

主要用途

可以提供周期中各倍體，如G1/G0、 S 和G2/M及Sub-G1峰百分比等信息;

送 樣 須 知

1. 樣品需是單細(xì)胞懸液。

2. 分選樣品細(xì)胞量：≥1×107 個細(xì)胞;

分析樣品細(xì)胞量：≥1×106個細(xì)胞

3. 細(xì)胞懸浮于1×PBS溶液中。

4. 上樣前必須用400目尼龍網(wǎng)或其他相當(dāng)大小的網(wǎng)過濾

5. 分選只能使用流式分選專用管;分析檢測可以使用多種類型的樣品管，包括任何品牌的12×75mm管和普通1.5ml和2.0ml EP管。

6. 需準(zhǔn)備好流式檢測對照管和補(bǔ)償管。

7. 每周一至周五，請?zhí)崆?-2周預(yù)約。取消預(yù)約者請至少提前1日向負(fù)責(zé)人說明，并將預(yù)約取消。

8. 第三方軟件分析時間：定于8：00-11：30(周二和周三);數(shù)據(jù)需是FCS3.0格式。