1. 流式細胞儀平臺儀器如下：

●BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分選型流式細胞儀，配備有633nm laser, 488nm laser 和 355nm UV laser

●BD Accuri C6 分析型流式細胞儀，配備有488nm laser 和 633nm laser.

2. 流式細胞儀平臺軟件如下：

 ●FlowJo 7.6.5 ● ModiFit 4.0

●BD FACSDiva 6.1.3 ● CFlow plus

3. 為保證大型高精度實驗儀器的順利運行，本平臺實行專人負責操作、維護及管理。儀器負責人需通過該平臺儀器的專業(yè)培訓并獲相關資質方可上機操作。

4. 本平臺實行儀器使用登記制度，紀錄儀器使用日期、儀器狀態(tài)、使用參數(shù)、檢測樣本量、使用人及儀器負責人。

5. 儀器原則上每周一至周五全天開放。

6. 儀器負責人應維持流式細胞儀及周圍環(huán)境的潔凈，實驗后需清洗機器管道、每周需清洗流動室、定期需更換儀器濾器、濾膜等，定期清空廢液桶，長期檢測機器控制、監(jiān)督公司定期維護等。

7. 申請使用流式細胞儀平臺請?zhí)崆?周到中心實驗室領取申請表填寫，主任簽字后交回。申請過程：經(jīng)院學委會同意后—索取申請單—填寫申請表—課題負責人簽字—中心實驗室負責人審核。樣品檢測需提前預約。申請人需認真查看“送樣須知”后填寫“使用申請單”，注明申請單位及科室以及課題名稱等，并附樣品來源、熒光素名稱、細胞數(shù)量及實驗相關信息。(“使用須知”及“使用申請單”可在預約時找平臺負責人領取)

8.數(shù)據(jù)管理

實驗結果以刻錄光盤形式發(fā)送，本平臺只保存實驗結果六個月;第三方軟件的分析結果可以通過E-mail形式發(fā)送。

9. 實驗中每次實驗的實驗者請不要超過2人，無關人員請不要私自進入實驗室;實驗結束后有義務通知下一個預約者，以盡量減少儀器開機空置時間。

10.實驗結束后，認真填寫實驗登記并簽字。

聯(lián)系人：劉錫娟 丁慧榮

聯(lián)系電話：88196715

地址：科研樓612 室

附：

流式細胞儀平臺使用須知

1. BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分選型流式細胞儀

BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分選型流式細胞儀是是BD公司生產(chǎn)的3激光9色多色流式系統(tǒng)兼具分析和分選雙向功能的臺式機，適用于臨床和基礎的科研需要。BD FACSAria Ⅱ具有高靈敏度、高分辨率、高分選精度和高速度分選的特點，同時因為特殊定制，配備有355nm激光，所以可以完成SP及其它紫外激光激發(fā)的熒光素標記的細胞的分析和分選。

主要用途：

●SP細胞分析及分選

●腫瘤干細胞分析及分選

●96孔板單個細胞分選

●GFP標記細胞分選

●紫外激光激發(fā)的熒光素標記的分析及分選

●多至9色的多色分析和分選

2. BD Accuri C6 分析型流式細胞儀

BD Accuri C6 分析型流式細胞儀配備有一根藍激光器 (488nm) 和一根紅激光器 (640nm)，具有以下特點：①其數(shù)據(jù)數(shù)字采集具有跨越7個數(shù)量級的動態(tài)范圍 (1600萬道的數(shù)值化數(shù)據(jù)解析度)，保證所有數(shù)據(jù)總是有效可用的，不會在收集過程中發(fā)生丟失數(shù)據(jù)。②它的操作軟件是開放式的，可以裝到每一位使用人的電腦上，在事后對收好的數(shù)據(jù)進行進一步優(yōu)化，以得到更為精確的分析結果。③可以使用多種類型的樣品管，包括任何品牌的12×75mm管和普通1.5ml和2.0ml EP管。

主要用途：

●細胞周期檢測

●細胞增殖檢測

●細胞凋亡檢測

●線粒體膜電位檢測(JC-1染色)

●腫瘤干細胞分析

●納米材料細胞吞噬的檢測

●細胞鈣流檢測

●CBA(Cytometric Beads Array)實驗

●ROS(reactive oxygen species)檢測實驗

●細胞膜、漿及核中蛋白因子及抗原的檢測

FlowJo7.6.5軟件

隨著流式細胞技術在科研工作中的應用愈加廣泛和常規(guī)化，科研工作者對流式細胞技術數(shù)據(jù)結果的分析需求和呈現(xiàn)方式越來越高，尤其是在文章發(fā)表或會議報告中愈發(fā)要求其客觀、直觀和美觀。為滿足這一需求，經(jīng)過前期調研和分析，中心實驗室流式細胞儀平臺遴選出一款流式細胞術第三方分析軟件FlowJo。FlowJo是TreeStar, San Carlos,CA公司開發(fā)的一款由生物科學家研發(fā)的兼容多種電腦操作系統(tǒng)的流式數(shù)據(jù)分析軟件，是各高影響力科學期刊使用最多的分析軟件，逐漸被視為流式研究分析領域的金標準。

主要用途

可以對FACSAria Ⅱ和Accuri C6流式細胞儀檢測輸出數(shù)據(jù)以及任何流式細胞儀輸出的FCS 3.0數(shù)據(jù)進行二次分析，比如動力曲線呈現(xiàn)，峰圖的疊加及立體呈現(xiàn)等等。

ModiFit軟件

ModiFit 4.0是美國Verity Software House公司開發(fā)的專用于周期分析的流式第三方軟件。

主要用途

可以提供周期中各倍體，如G1/G0、 S 和G2/M及Sub-G1峰百分比等信息;

送 樣 須 知

1. 樣品需是單細胞懸液。

2. 分選樣品細胞量：≥1×107 個細胞;

分析樣品細胞量：≥1×106個細胞

3. 細胞懸浮于1×PBS溶液中。

4. 上樣前必須用400目尼龍網(wǎng)或其他相當大小的網(wǎng)過濾

5. 分選只能使用流式分選專用管;分析檢測可以使用多種類型的樣品管，包括任何品牌的12×75mm管和普通1.5ml和2.0ml EP管。

6. 需準備好流式檢測對照管和補償管。

7. 每周一至周五，請?zhí)崆?-2周預約。取消預約者請至少提前1日向負責人說明，并將預約取消。

8. 第三方軟件分析時間：定于8：00-11：30(周二和周三);數(shù)據(jù)需是FCS3.0格式。