1. 生物質(zhì)譜平臺儀器如下：

●基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜 MALDI-TOF/TOF (Bruker Daltonics UltraFlex III)

●液相色譜-四級桿-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜儀(micrOTOFQ II LC/MS QTOF)(nanoLC：Dionex;MS：Bruker Daltonics)

2. 本平臺在滿足本院研究人員需求的同時，也對兄弟院校開放檢測。

3. 為保證大型高精度實(shí)驗(yàn)儀器的順利運(yùn)行，本平臺實(shí)行專人負(fù)責(zé)操作、維護(hù)及管理。儀器負(fù)責(zé)人需通過該平臺儀器的專業(yè)培訓(xùn)并獲相關(guān)資質(zhì)方可上機(jī)操作。不開放他人上機(jī)操作。

4. 本平臺實(shí)行儀器使用登記制度，記錄儀器使用日期、儀器狀態(tài)、樣品名稱及使用人。

5. 儀器原則上365天24小時開機(jī)，如遇特殊情況，負(fù)責(zé)人應(yīng)嚴(yán)格按照儀器開關(guān)機(jī)程序操作。

6. 儀器負(fù)責(zé)人應(yīng)維持質(zhì)譜儀及周圍環(huán)境的潔凈，定期檢查環(huán)境的溫度和濕度、氮?dú)獾膲毫?、泵油的狀態(tài)、濾網(wǎng)的潔凈度、清洗噴霧相關(guān)配件、清空廢液瓶等。

7. 申請使用

樣品送檢需提前預(yù)約。申請人需認(rèn)真查看“送樣須知”后填寫“使用申請單”，注明申請單位及科室以及課題名稱等，并附樣品來源、濃度及相關(guān)信息僅收取成本費(fèi)。(“使用須知”及“使用申請單”可在預(yù)約時找平臺負(fù)責(zé)人領(lǐng)取)。

8. 數(shù)據(jù)管理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果根據(jù)申請人要求可以打印報告、E-mail或者刻錄光盤形式發(fā)送，本平臺只保存實(shí)驗(yàn)結(jié)果六個月。

聯(lián)系人：沈靖、田慧芳 聯(lián)系電話：88196715/6720

地點(diǎn)：科研樓612室

附：

生物質(zhì)譜技術(shù)平臺使用須知

1. 基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(Ultraflex III? MALDI TOF /TOF)

MALDI-TOF-MS)是近年來發(fā)展起來的一種新型的軟電離生物質(zhì)譜。適用于混合物及生物大分子的測定。MALDI-TOF-MS具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高及分辨率高等特點(diǎn)，為生命科學(xué)等領(lǐng)域提供了一種強(qiáng)有力的分析測試手段。該平臺是新一代標(biāo)準(zhǔn)模塊化飛行時間質(zhì)譜儀，具有smartbeam?激光技術(shù)，配有MALDI離子源、線性和反射操作模式、源后裂解(PSD)串聯(lián)質(zhì)譜和高能量碰撞誘導(dǎo)解離 (CID)。

主要用途：

●結(jié)合磁珠即液體芯片用于從復(fù)雜體液發(fā)現(xiàn)潛在的生物標(biāo)志物

●蛋白質(zhì)樣品分子量測定

●肽質(zhì)量指紋圖譜(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)分析

●多肽序列測定

●蛋白質(zhì)的磷酸化、糖基化等翻譯后修飾分析

●寡核苷酸多態(tài)性分析

2. 液相色譜-四級桿-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜儀(micrOTOFQ II LC/MS QTOF)

micrOTOFQ II 屬于四級桿-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜(Q-TOF MS)類質(zhì)譜。其主要組成部分包括電噴霧離子漏斗源、四級桿、TOF質(zhì)量分析器、注射泵和數(shù)據(jù)采集與處理部分。該質(zhì)譜與液相色譜聯(lián)用自動進(jìn)樣，適合于多肽的分離、檢測與測序，可應(yīng)用在大規(guī)模藥物開發(fā)、蛋白質(zhì)組學(xué)等新興技術(shù)領(lǐng)域。

主要用途：

●蛋白質(zhì)樣品分子量測定

●精確質(zhì)量測定及元素組成分析

●肽質(zhì)量指紋譜

●多肽序列測定

●蛋白質(zhì)的磷酸化、糖基化等翻譯后修飾分析

●與二維液相相聯(lián)，可進(jìn)行多肽的分離、檢測與測序

送樣須知

蛋白樣品鑒定：

1. 樣品量：50pmol干粉或1ug/uL以上(一般測試)

100pmol干粉或1ug/uL以上(MALDI串聯(lián)質(zhì)譜分析)

2. 鹽含量：揮發(fā)性無機(jī)鹽<20mM，請勿使用PBS、SDS和尿素等質(zhì)譜干擾物質(zhì);

3. 銀染過程中不得使用戊二醛作為固定劑;

4. 電泳過程中，請操作者戴口罩、帽子、無粉手套，以防止角蛋白污染;

5. 送樣時，請?zhí)峁悠沸畔ⅲ悠访Q、膠圖、分子量大小、種屬等。

生物標(biāo)志物分析：

1. 適于分析各種體液(血液、尿液、胃液、前列腺液及乳頭分泌液等)及蛋白提取液，蛋白提取液應(yīng)統(tǒng)一進(jìn)行蛋白定量。

2. 統(tǒng)一規(guī)范取樣過程，血清樣本的收集和保存方法如下：

(1)使用BD真空抽血管(不抗凝)清晨空腹抽血2-5ml，半小時內(nèi)放入4℃冰箱保存，4℃3000轉(zhuǎn)離心5分鐘。取上清加入eppendorf管。再次3000轉(zhuǎn)離心5分鐘，0.5ml eppendorf管分裝，20μl/管，放入-80℃保存，每個樣本至少3管以上(以備重復(fù)檢測)。

(2)血清樣本在離體4小時內(nèi)，應(yīng)完成離心、分裝等過程，并放入-80℃保存。期間所有操作均在4℃以下進(jìn)行，所有樣本保證只凍融一次。

注：樣本不能有溶血，不能將下層的細(xì)胞吸入，不能吸入上層油脂;操作時不要戴有粉乳膠手套，以免滑石粉干擾對樣品的檢測。

3. 樣本應(yīng)標(biāo)記清楚，材料齊全。

4. 實(shí)驗(yàn)耗材的統(tǒng)一 為保證樣品的質(zhì)量及條件的統(tǒng)一，對耗材要求如下：

Pipet Tips(Axygen公司)

Eppendorf 管 (Axygen公司)

BD真空抽血管(不抗凝)(BD公司)

5. 每周一至周五，請?zhí)崆?-2周預(yù)約。